免疫标记分析法检测蓖麻毒素

免疫标记方法是将抗原或抗体进行生物学标记,利用蓖麻毒素抗原位点能与抗体发生特异性结合的特点而建立的检测方法,是检测蓖麻毒素最常用的技术手段。常用的免疫抗体标记方法有酶联免疫吸附法、胶体金标记法及放射免疫法。利用自制的抗体(以羊为抗体制备动物制得)进行研究,结果表明,ELISA 方法可检测到生物样品中微克级的蓖麻毒素。通过进一步研究,建立了夹心ELISA方法,检出限可达 2.5 ng/mL。 早期酶联免疫吸附法主要采用多克隆抗体,可能存在一定程度上的交叉反应,影响检测结果的精确性。而单克隆抗体是利用某一抗原表位为抗体,具有特异性较高的特点。因此,以单克隆抗体为基础的蓖麻毒素检测方法,是快速、灵敏、经济、实用的定量检测方法。刘文森利用胶体金技术标记所制备的单克隆抗体,进行检测试剂条的制备。结果表明,随着蓖麻毒素浓度的增加,胶体金试剂条的颜色逐渐减弱,试剂条的检测灵敏度可达 10 μg/mL,满足检测需求。......阅读全文

免疫标记分析法检测蓖麻毒素

  免疫标记方法是将抗原或抗体进行生物学标记,利用蓖麻毒素抗原位点能与抗体发生特异性结合的特点而建立的检测方法,是检测蓖麻毒素最常用的技术手段。常用的免疫抗体标记方法有酶联免疫吸附法、胶体金标记法及放射免疫法。利用自制的抗体(以羊为抗体制备动物制得)进行研究,结果表明,ELISA 方法可检测到生物样

放射免疫检测法检测蓖麻毒素的介绍

  随着生物标记技术的进一步发展,研究者成功建立了放射免疫检测方法。该方法主要是利用抗原-抗体特异性结合而进行体外超微量蓖麻毒素检测,具有高度灵敏性、精确性的特点。放射免疫方法可检测出样品中100pg数量级的蓖麻毒素,适用于对蓖麻毒素中毒者血液中蓖麻毒素含量的检测。但该方法的缺点是操作处理比较繁琐,

概述蓖麻毒素的检测方法

  蓖麻毒素具有很强的毒性作用,毫克级的剂量即可致人或动物死亡。但截至目前,适用于人的解毒药和特异性抗毒素特效药尚未被研制出来。因此,建立快速有效的检测方法成为国内外学者研究的热点。根据蓖麻毒素的理化性质、生物化学特性及免疫学特性,建立了免疫吸收分析、生物传感器分析及生物质谱分析等方法。

蓖麻毒素的生物质谱技术检测

  基质辅助激光解吸/电离(MALDI)及电喷雾等技术为分析极性强、难挥发等特点的生物样品提供了可靠条件。肽质量指纹谱是利用特异性蛋白酶对不同蛋白质一级结构进行水解处理后得到具有独特特征的肽混合物,称其为指纹谱。该方法是目前进行蛋白质鉴定的常用方法。将待测蛋白质样品经垂直板电泳或二维电泳分离,经酶切

蓖麻毒素的生物传感法检测方法介绍

  生物传感器是将生物技术和电子技术联合使用,将待测物与识别元件特异性结合后产生的生物敏感物质的化学信号转变为电信号、光信号等,从而达到分析检测目的。该方法无需特殊标记物,具有选择性好、操作简单、实时在线监测的特点,是医学诊断、食品卫生检验等领域安全快速检测的研究热点。

蓖麻毒素的毒理分析

  蓖麻毒素是一种细胞毒。当毒素进入体内,A、B链分开。A链通过渗透经细胞膜进入细胞浆,主要使真核细胞的核糖体抑制失活,从而抑制蛋白质的合成。B链与细胞表面结合,通过内陷作用转入细胞内,它能促使A链进入胞浆。  蓖麻毒素对小鼠艾氏腹水瘤细胞、LD12白血病、B16黑痣瘤和列文斯肺癌细胞均有明显的抑制

免疫分析法标记技术

  基本原理:采用荧光素、同位素或酶等示踪物质 标记抗体(或抗原)进行抗原 -抗体反应,通过对免疫复合物中的标记物的测定,达到对免疫反应进行监测的目的。  标记免疫技术主要类型:放射免疫技术、酶免疫技术、荧光免疫技术、化学发光免疫技术  放射免疫标记技术(RIA)  基本原理:根据抗原抗体特异性结合

高效液相色谱法检测蓖麻毒素的介绍

  高效液相色谱检测将待测物质溶于流动相中,利用色谱柱固定相将流动相的组成进行分离,对检测器收集到的峰信号转换为待测物质浓度,进而来判定待测物质含量的一种方法,具有速度快、分辨率高、灵敏度高等特点。采用PROTEIN KW-802.5凝胶色谱柱,在柱温25℃、流速1mL/min、进样量10μL的条件

免疫分析法的标记技术

基本原理:采用荧光素、同位素或酶等示踪物质 标记抗体(或抗原)进行抗原 -抗体反应,通过对免疫复合物中的标记物的测定,达到对免疫反应进行监测的目的。标记免疫技术主要类型:放射免疫技术、酶免疫技术、荧光免疫技术、化学发光免疫技术 基本原理:利用化学或生物发光系统作为抗原抗体反应的指示系统,借以定量检测

免疫分析法的标记技术

基本原理:采用荧光素、同位素或酶等示踪物质 标记抗体(或抗原)进行抗原 -抗体反应,通过对免疫复合物中的标记物的测定,达到对免疫反应进行监测的目的。标记免疫技术主要类型:放射免疫技术、酶免疫技术、荧光免疫技术、化学发光免疫技术 基本原理:利用化学或生物发光系统作为抗原抗体反应的指示系统,借以定量检测

免疫分析法的标记技术

基本原理:采用荧光素、同位素或酶等示踪物质 标记抗体(或抗原)进行抗原 -抗体反应,通过对免疫复合物中的标记物的测定,达到对免疫反应进行监测的目的。标记免疫技术主要类型:放射免疫技术、酶免疫技术、荧光免疫技术、化学发光免疫技术 基本原理:利用化学或生物发光系统作为抗原抗体反应的指示系统,借以定量检测

免疫分析法的标记技术

  基本原理:采用荧光素、同位素或酶等示踪物质 标记抗体(或抗原)进行抗原 -抗体反应,通过对免疫复合物中的标记物的测定,达到对免疫反应进行监测的目的。  标记免疫技术主要类型:放射免疫技术、酶免疫技术、荧光免疫技术、化学发光免疫技术  放射免疫标记技术(RIA)  基本原理:根据抗原抗体特异性结合

概述蓖麻毒素的结构特点

  蓖麻毒素(约占蓖麻蛋白的5%,分子量约为66kD)是一种Ⅱ型异二聚体核糖体失活蛋白,由核糖体失活酶(蓖麻毒素A链)及与半乳糖/N-乙酰半乳糖胺特异结合的凝集素(蓖麻毒素B链)组成,二者之间连接一个二硫键。对蓖麻毒素的一级结构进行分析发现,A链含有267个氨基酸残基,分子量约为32kD,具有催化活

蓖麻毒素的理化性质

  蓖麻毒素的一、二级结构已清楚,由A、B两条链组成。A链比B链稍短,两链之间以一个二硫键相连接。它含有共价键结合的糖分子,糖的主要组成是甘露糖、葡萄糖和半乳糖。分子量为66,000。在0.1g分子半乳糖溶液中,毒素可在冰箱中贮存数月而不失活性,但煮沸易失去活性。  蓖麻毒素是从蓖麻籽中提取的植物糖

化学发光标记免疫分析法

化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL IA ) ,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物——acridin ium ester (A E) ,是有效的发光标记物[ 3 ] , 其通过起动发光试剂(N aOH2H2O 2 ) 作用而发

化学发光标记免疫分析法

   化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL IA ) ,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物——acridin ium ester (A E) ,是有效的发光标记物[ 3 ] , 其通过起动发光试剂(N aOH2H2O 2 ) 作用而发光

蓖麻毒素的临床表现介绍

  小鼠静脉注射LD50值为2.7μg/kg,腹腔注射为7~10μg/kg;对狗LD50值为0.6μg/kg;人致死量约为7mg。中毒后数小时出现症状。早期有精神不振,恶心呕吐,腹痛、腹泻、便血;继则出现脱水、血压下降,休克嗜睡;严重者可出现抽搐、昏迷,牙关紧闭;最后因循环衰竭而死亡。少数病人可出现

蓖麻毒素抑制蛋白质合成

  蓖麻毒素具有强烈的细胞毒性,属于蛋白合成抑制剂或核糖体失活剂,这也是在构建免疫毒素时,应用到蓖麻毒素的主要原因。  合成的机理在20世纪70年代已经明确。首先,毒素依靠B链上的半乳糖结合位点与细胞表面含末端半乳糖残基的受体结合,促进整个毒素分子以内陷方式进入细胞,形成细胞内囊,毒素从细胞内囊中进

蓖麻毒素诱导细胞凋亡的作用机制

  坏死和凋亡是细胞死亡的两种方式。在引起细胞凋亡的三大类因素中,毒素,抗癌药物是其中之一。以往认为化疗药物是通过引起靶细胞发生不可逆代谢障碍而杀死肿瘤细胞,近年来认为是通过改变生理环境而诱发细胞发生PCD而达到疗效。  1989年,Leek等报道:在蓖麻毒素中毒的肠道病理研究中利用免疫组织化学和电

关于蓖麻毒素的基本信息介绍

  蓖麻毒素,为具有两条肽链的高毒性的植物蛋白。它主要存在于蓖麻籽中。该毒素易损伤肝、肾等实质器官,发生出血、变性、坏死病变。并能凝集和溶解红细胞,抑制麻痹心血管和呼吸中枢,是致死的主要原因之一。  小鼠静脉注射LD50值为2.7μg/kg,腹腔注射为7~10μg/kg;对狗LD50值为0.6μg/

薄层分析法检测黄曲霉毒素

  TLC法是检测黄曲霉素最为经典的方法,也是以前最为常用的方法,至今仍为一些检测机构所用,也是一种国标方法。其原理是针对不同的试样,用适宜的萃取溶剂将黄曲霉素从试样中萃取出来,经柱层析净化后,再在薄板上展开后分离。利用黄曲霉素的荧光特性,根据荧光斑点的强弱与标准比较确定其含量,对于一些组分很复杂的

免疫亲和柱荧光计快速分析法测定呕吐毒素

呕吐毒素介绍脱氧雪腐镰刀菌烯醇,又称为呕吐毒素,属单端孢霉烯族化合物。该毒素是F.镰刀菌霉(主要是 F.graminearum h 和 F.culmorum)的二级代谢产物,化学名为3α,3β,7α,15-四羟基镳草镰刀菌-9-烯-8-酮。这类真菌大多在低温、潮湿和收割季节,在谷物庄稼中慢慢生长。呕

薄层分析法检测黄曲霉毒素的介绍

  TLC法是检测黄曲霉素最为经典的方法,也是以前最为常用的方法,至今仍为一些检测机构所用,也是一种国标方法。其原理是针对不同的试样,用适宜的萃取溶剂将黄曲霉素从试样中萃取出来,经柱层析净化后,再在薄板上展开后分离。利用黄曲霉素的荧光特性,根据荧光斑点的强弱与标准比较确定其含量,对于一些组分很复杂的

黄曲霉毒素检测方法薄层分析法(TLC)

TLC法是检测黄曲霉素最为经典的方法,也是以前最为常用的方法,至今仍为一些检测机构所用,也是一种国标方法。其原理是针对不同的试样,用适宜的萃取溶剂将黄曲霉素从试样中萃取出来,经柱层析净化后,再在薄板上展开后分离。利用黄曲霉素的荧光特性,根据荧光斑点的强弱与标准比较确定其含量,对于一些组分很复杂的试样

关于蓖麻毒蛋白的检测介绍

  蓖麻毒蛋白分析检测尚缺乏简单、快速、准确的定量分析方法,通用的方法如红血细胞凝集法、280nm紫外吸收法,仅达目视比较半定量分析,还不适用于工业化规模的产品控制分析,更缺乏同时检出能力。郑成、高宝岩用高效液相色谱法在色谱柱150×4.6mm,5μm键合C4固定相,水、乙腈混合流动相,流速1mL/

蓖麻毒素导致脂质过氧化损伤的作用

  蓖麻毒素与巨噬细胞的相互作用,不仅诱导细胞免疫,而且诱导产生自由基和活性氧,引起脂质过氧化作用。1991年,Muldoon和Stohes发现蓖麻毒素可以诱导小鼠体内的脂质过氧化作用,结果导致尿液中丙二醛、甲醛、丙酮的含量增加。1992年的研究表明,各脏器中脂质过氧化强度(MDA含量),还原型谷胱

真菌毒素免疫检测技术的研究

真菌毒素,又称霉菌毒素,是指霉菌在其所污染食品中产生的有毒代谢产物,可通过进食进入人或动物体内,引起人或动物的急性或慢性中毒,进而损害机体的肝脏、肾脏、神经组织等。致癌性是真菌毒素对机体最严重和最普遍的危害。真菌毒素可在农作物生长或收获时形成,也会因贮存条件的不适宜而产生。湿度或温度高的环境通常有利

呕吐毒素检测酶联免疫操作流程

呕吐毒素检测仪酶联免疫操作流程:呕吐毒素又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON),是单端孢菌素烯烃中的一种,其通常是由生长在谷类物品(如小麦、玉米、大麦和秣草)霉菌镰红菌素生成的。呕吐毒素DON广泛存在于全球,主要污染小麦、大麦、玉米等谷类作物,也污染粮食制品,人、动物在误食被呕吐毒素污染的粮食谷物后可能产

关于蓖麻毒素诱导细胞因子损伤的作用机理介绍

  蓖麻毒素诱导细胞因子的机理目前多数认为是通过刺激淋巴样细胞产生的。主要为巨噬细胞和肝Kupffer′s细胞。这些细胞表面含有甘露糖受体,可与蓖麻毒素分子中3个末端甘露糖残基特异结合而优先被摄取。蓖麻毒素诱导细胞因子的分泌有剂量和时间依赖性。毒素是否可诱导其他细胞因子的产生以及各细胞因子之间是否具

酶联免疫检测技术的应用现状和发展前景

酶联免疫检测技术的应用 真菌毒素的检测:黄曲霉毒素 B 1 、 M 1 以及 T-2 毒素,脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素 DON ),二乙酰草镰刀菌烯醇( DAS ),玉米赤霉烯酮,赫曲霉毒素 A ( OA )。 农药的检测:主要有除草剂与杀虫剂两大类,例如杀暝松( FN )、甲氟磷酸异已酶( SO