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自旋标记法的原理及方法特点

因自由基有不成对电子自旋,所以称自旋标记(H.M.McConnell)。开始是用氯丙嗪阳离子自由基研究其与DNA的相互作用,后来则用稳定的硝酰(基)自由基类。有N-羟四甲基六氢吡啶(四氢吡咯)衍生物以及N-羟二甲基1,3-氧氮杂环戊烷衍生物等。有合成在标记物的局部含有反应性的官能团,使之与活体高分子等反应而结合于特定的部位;或合成与活体有关的含硝基氧(ni-troxide)基的低分子化合物,加于活体以观察其相互作用等方法。一般标记蛋白质的胱氨酸基,通过标记物的动的变化来检查局部环境的变化。另外通过自旋标记的磷脂已查明了生物膜或类脂双层膜内类脂分子的扩散类脂的烷基链的弯曲性,为探明生物膜的行动的结构作出了贡献。......阅读全文

自旋标记法的原理及方法特点

因自由基有不成对电子自旋,所以称自旋标记(H.M.McConnell)。开始是用氯丙嗪阳离子自由基研究其与DNA的相互作用,后来则用稳定的硝酰(基)自由基类。有N-羟四甲基六氢吡啶(四氢吡咯)衍生物以及N-羟二甲基1,3-氧氮杂环戊烷衍生物等。有合成在标记物的局部含有反应性的官能团,使之与活体高分子

自旋标记法的方法介绍

自旋标记 (spin label), 很多物质的分子不表现电子自旋共振(ESR),但对这些分子,人工地使之与自由基(free radical)结合从而得以用ESR法来研究,获得独特的ESR信息,这就是自旋标记法。

电子顺磁共振谱仪自旋标记法

  由美国的 H·M·麦康奈尔于1965年创立,系指将一种稳定的自由基(最常用者为氮氧自由基)结合到单个分子或处于较复杂系统内的分子上的特定部位,而从电子顺磁共振波谱取得有关标记物环境的信息。在进行自旋标记时,应注意到尽量保持专一性和减少对天然系统的生物特性和分子特性引起的扰动。  自旋标记物有4个

酶标分析仪的功能特点及工作原理

   酶标分析仪的功能特点   酶标分析仪在实验室中应用的主要作用就是用于酶联免疫吸附试验,可以分为单通道酶标分析仪、多通道酶标分析仪、全自动酶标分析仪和半自动酶标分析仪。   酶标分析仪的工作原理   酶标分析仪的工作原理简单点来说,其实就是将光信号转化成电信号,在进行处理计算的过程,而具体的工作

微卫星标记法的特点

与其它标记技术相比,具有以下特点:首先,在每个微卫星DNA 两端的序列多是相对保守的单拷贝序列,尤其在亲缘关系相近的物种间是保守的,而且在一些紧密相关的物种中其重复单位和重复次数具有一定的相似性。其次,这些小的、串联排列的重复序列经常是通过核苷酸链的滑动错配或者其它未知的过程来改变它们的长度,从而导

连续标记法的技术特点

连续标记法是指在植物生长某个生育期,甚至整个生育期内,对植物进行不间断标记的一种方法。连续标记法有助于定量全部生育期或某一生育期全部投入,但由于成本高以及技术困难,运用受到限制。

免疫酶标方法的方法原理

免疫酶标方法是继免疫荧光后,于60年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是最常用的技术。本方法与免疫荧光技术相比的主要优点是:定位准确,

酶联免疫吸附酶标记法的方法特点介绍

酶与抗体交联,常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行,标记效果好,特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为:将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中,加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠(NaIO4)水溶液0.5ml,混匀置4℃冰箱30分钟 , 取出

改良过碘酸钠标记法制备酶标抗体

HRP分子中与酶活性无关的糖基被过碘酸钠氧化为醛基,再与抗体蛋白的氨基形成Schiff碱。为了防止酶蛋白的氨基与醛基发生自身偶联,在标记前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封闭酶蛋白中残留的a-和e-氨基。酶与抗体的结合反应后,再加入硼氢化钠还原成稳定的结合物。 (1) 取HRP 5mg溶

免疫电镜胶体金标记法(简称金标法)

1、 包埋后染色 (超薄切片的金标记法)(1)超薄切片厚50~70nm左右,载于200~300网孔的镍网上;(2)滴1%的H2O2液1滴于蜡板上,将网的载片面轻浮于液滴上10min至1h;(3)双蒸水洗3次,每次10分钟。第1、2次洗法如(2),浮于液面上,第3次以盛双蒸水的注射器沿镍网面冲洗,水流