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什么是正相色谱法和反相色谱法

正相色谱是指流动相的极性小于固定相的极性;反相色谱是指流动相的极性大于固定相的极性.对于反相色谱,极性越小的物质,流动相的极性越大,保留时间越长.极性越小的物质,流动相的极性越小,保留时间越短.对于极性大的物质来说,流动相的极性对其保留时间影响较小.而正相色谱正好相反.因此在应用上正相色谱用于分离极性较大的物质,如蛋白质、生物碱等.反相色谱多用于分离极性较小的物质,在流动相的选择上,反相色谱的优势更大,在实际工作中反相色谱的应用更为广泛......阅读全文

反相色谱法

反相色谱法应用中性、非极性大孔的填充材料和极性流动相。分离基于被分析物质与固定相之间的相互作用,换句话说,也就是样品的疏水性。

反相薄层色谱法

反相薄层色谱法反相薄层色谱是利用化学键合反应,将烃基硅烷键合到硅胶表面,制成非极性固定相,用极性较大的液体作流动相进行分离分析的方法,可克服疏水板对溶剂、系统的限制,其流动相含水量根据键合相不同可达20%~80%不等。常用展开剂是水和甲醇混合溶剂,其次是水和乙腈,并可使用强酸或强碱作流动相。本法可用

什么是反相色谱法?

反相色谱法(英语:Reversed-phase chromatography,RPC)反相色谱法(IGC)一反普通气相色谱的测定方式。以被测的高分子为固定相、以惰性气体为流动相,为了测定需要,在流动相中加入一些探针分子,它们是挥发性的低分子。将探针分子注入气化室气化后,由载气带入色谱柱,测定它们在两

反相色谱法的简介

“反相”这个词有着其历史背景。在1970年代,大多数液相色谱是在未修饰的氧化硅或氧化铝上完成的,他们表面的化学性质是亲水性的,对于极性化合物具有更强的亲和力,因此也叫做“正相”(正常)色谱。若采用烷基链共价键合到支持表面上,则会倒换洗脱顺序。在反相色谱法中,极性化合物先被洗脱出来,而非极性化合物被保

常用色谱法介绍--反相色谱法

反相色谱法(英语:Reversed-phase chromatography,RPC)反相色谱法(IGC)一反普通气相色谱的测定方式。以被测的高分子为固定相、以惰性气体为流动相,为了测定需要,在流动相中加入一些探针分子,它们是挥发性的低分子。将探针分子注入气化室气化后,由载气带入色谱柱,测定它们在两

反相色谱法的特点介绍

一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于分离非极性和极性较弱的化合物。RPC在现代液相色谱中应用最为广泛,据统计,它占整个HPLC应用的80%左右。

反相色谱法的影响因素

1、溶质的分子结构(极性)极性越弱,疏水性越强,k越大,tR也越大。同系物碳数越多,极性越弱,k越大;引入极性取代基,降低疏水性,k值变小。2、固定相键合烷基的疏水性随碳链的延长而增加,溶质的k也增大。硅胶表面键合烷基的浓度越大,则溶质的k越大。3、流动相极性越强,洗脱能力越弱,使溶质的k越大;溶剂

反相色谱法的分离机制

在反相色谱法中的固定相是被共价结合到硅胶载体上的直链饱和烷烃,其链的长短不同,最长的是十八烷基、这也是使用得最多的固定相、流动相的极性比固定相的极性强。在反相键合相色谱中,极性大的组分先流出、极性小的组分后流出。一般说来,固定相上的烷基配合基或被分离分子中非极性部分的表面积越大,或者流动相表面张力及

什么是正相色谱法和反相色谱法

正相色谱是指流动相的极性小于固定相的极性;反相色谱是指流动相的极性大于固定相的极性.对于反相色谱,极性越小的物质,流动相的极性越大,保留时间越长.极性越小的物质,流动相的极性越小,保留时间越短.对于极性大的物质来说,流动相的极性对其保留时间影响较小.而正相色谱正好相反.因此在应用上正相色谱用于分离极

什么是反相键合相色谱法

反相键合相色谱法  典型的反相键合色谱法是用非极性固定相和极性流动相组成的色谱体系。固定相,常用十八烷基(ODS或C)键合相;流动相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相色谱系统,用弱极性或中等极性的键合相和极性大于固定相的流动相组成。  (1) 分离机制 反相键合相表面具有非极性烷基官能团,及未被取代