简述单克隆抗体的动物免疫

单克隆抗体制备的宿主动物一般选用BALB/c小鼠,鼠单抗的应用范围相当广泛,一些国内外公司均开发出了兔的单克隆抗体制备技术。 免疫原分为可溶性抗原和颗粒性(细胞)抗原,用无菌盐水稀释并与佐剂混合,腹腔注射抗原与佐剂彻底混匀后形成的稳定乳状液,在免疫原提供持续的免疫应答基础上进行加强免疫 周期第1天 采血0.2ml(获得0.1ml免疫前血清) 第一次免疫(抗原加弗氏完全佐剂) 第14天 第二次免疫(抗原加弗氏不完全佐剂) 第21天 采血和ELISA检测 第35天 第三次免疫(抗原加弗氏不完全佐剂) 第42天 采血和ELISA检测 第56天 第四次免疫(抗原溶于PBS或盐水) 第61天 细胞融合......阅读全文

简述单克隆抗体的动物免疫

  单克隆抗体制备的宿主动物一般选用BALB/c小鼠,鼠单抗的应用范围相当广泛,一些国内外公司均开发出了兔的单克隆抗体制备技术。  免疫原分为可溶性抗原和颗粒性(细胞)抗原,用无菌盐水稀释并与佐剂混合,腹腔注射抗原与佐剂彻底混匀后形成的稳定乳状液,在免疫原提供持续的免疫应答基础上进行加强免疫  周期

关于单克隆抗体的动物免疫的介绍

  单克隆抗体制备的宿主动物一般选用BALB/c小鼠,鼠单抗的应用范围相当广泛,一些国内外公司均开发出了兔的单克隆抗体制备技术。  免疫原分为可溶性抗原和颗粒性(细胞)抗原,用无菌盐水稀释并与佐剂混合,腹腔注射抗原与佐剂彻底混匀后形成的稳定乳状液,在免疫原提供持续的免疫应答基础上进行加强免疫  周期

单克隆抗体时动物的选择与免疫

一、动物的选择 目前应用最广的是小白鼠和大白鼠,尤以小白鼠为好。就品系而言以Balb/c小白鼠应用最广,因为所有的小白鼠骨髓瘤系均从Balb/c小白鼠系诱导出来。Balb/c系小白鼠必须用纯系的,雌雄均可,以8~12周龄为宜。大白鼠也可,能产生较多量的单抗体。现在已经在小鼠杂交瘤的基础上,发展了

单克隆抗体制备动物的选择与免疫

1、动物的选择目前应用最广的是小白鼠和大白鼠,尤以小白鼠为好。就品系而言以Balb/c小白鼠应用最广,因为所有的小白鼠骨髓瘤系均从Balb/c小白鼠系诱 导出来。Balb/c系小白鼠必须用纯系的,雌雄均可,以8~12周龄为宜。大白鼠也可,能产生较多量的单抗体。现在已经在小鼠杂交瘤的基础上,发展了

单克隆抗体技术动物免疫的操作过程

  (1) 抗原制备。制备单克隆抗体的免疫抗原,从纯度上说虽不要求很高,但高纯度的抗原使得到所需单抗的机会增加,同时可以减轻筛选的工作量。因此,免疫抗原是越纯越好,应 根据所研究的抗原和实验室的条件来决定。一般来说,抗原的来源有限,或性质不稳定,提纯时易变性,或其免疫原性很强,或所需单抗是用于抗原不

单克隆抗体技术的方法动物免疫操作过程

(1) 抗原制备。制备单克隆抗体的免疫抗原,从纯度上说虽不要求很高,但高纯度的抗原使得到所需单抗的机会增加,同时可以减轻筛选的工作量。因此,免疫抗原是越纯越好,应 根据所研究的抗原和实验室的条件来决定。一般来说,抗原的来源有限,或性质不稳定,提纯时易变性,或其免疫原性很强,或所需单抗是用于抗原不同组

如何筛选动物单克隆抗体

单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的.第一次筛选的原理与方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键.普遍采用的HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A

如何筛选动物单克隆抗体

单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的.第一次筛选的原理与方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键.普遍采用的HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A

简述单克隆抗体的抗原准备

  抗原,是指能够刺激机体产生(特异性)免疫应答,并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体外结合,发生免疫效应(特异性反应)的物质。  抗原的基本特性有两种,  一是诱导免疫应答的能力,也就是免疫原性,  二是与免疫应答的产物发生反应,也就是抗原性。  很多物质都可以成为抗原,抗原的具体分类可以参见

简述单克隆抗体的制备过程

1.对小鼠注射特定的抗原蛋白,使小鼠产生免疫反应;2.得到相应的B淋巴细胞;3.将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,再用特定的选择培养基进行筛选;4.在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂种细胞才能生长(这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体)5.

动物免疫实验

实验概要将某种蛋白注射新西兰大耳兔产生免疫反应,通过ELISA检测免疫产生的抗体。实验原理将抗原吸附在固相载体表面,加入抗血清,抗体和抗原在载体表面形成抗原-抗体复合物,洗去未结合抗体,然后加入辣根过氧化物酶标记的二抗(抗体的抗体),二抗与抗体结合,洗去未结合二抗,加底物显色剂显色,在一定波长下测定

动物免疫实验

实验概要将某种蛋白注射新西兰大耳兔产生免疫反应,通过ELISA检测免疫产生的抗体。实验原理将抗原吸附在固相载体表面,加入抗血清,抗体和抗原在载体表面形成抗原-抗体复合物,洗去未结合抗体,然后加入辣根过氧化物酶标记的二抗(抗体的抗体),二抗与抗体结合,洗去未结合二抗,加底物显色剂显色,在一定波长下测定

简述动物固醇的作用

  1、预防心血管系统疾病  动物性食品摄入过多或人体调节功能出现障碍,会导致血清中胆固醇浓度过高,容易引发高血压及冠心病。植物甾醇可促进胆固醇的异化,抑制胆固醇在肝脏内的生物合成,并抑制胆固醇在肠道内的吸收,从而具有预防心血管疾病的作用。胆固醇还是细胞膜的重要成分,在人体内参与血液中脂质的运输。 

实验动物免疫方案

实验动物免疫方案1、抗原: 蛋白质、多肽、细胞器、细胞、组织等。2、免疫方式:皮下注射、腹腔注射、静脉注射、肌肉注射等。3、不同动物免疫所需抗原量(以蛋白免疫为例)>18-20kDa                 

实验动物免疫方案

实验材料兔子 小鼠 大鼠 绵羊 母鸡试剂、试剂盒抗原 Elisa试剂盒 消毒酒精 碘酒仪器、耗材注射器 针头 一次性手套 剪刀 镊子 动物固定架 塑料放血管 试管 血管夹 离心机 冰箱 手术器械用免疫学的基本理论和技术来诊断、预防和治疗疾病,并在此基础上开展的采用人工方法向机体输入由他人或动物产生的

多抗制备动物免疫

制备好抗原后,就要进行动物免疫了,免疫这一步除了动物自身的因素外,实验者也要有良好的计划才能得到更好的免疫效果。这里就几个常见的问题作一下简单的讨论。 动物的选择。常见的可以用来制备抗体的动物有:小鼠(Mouse)、大鼠(Rat)、豚鼠(Guinea pig)、仓鼠(Hamster)、兔(Rab

实验动物免疫方案

1、抗原: 蛋白质、多肽、细胞器、细胞、组织等。2、免疫方式:皮下注射、腹腔注射、静脉注射、肌肉注射等。3、不同动物免疫所需抗原量(以蛋白免疫为例)>18-20kDa

介绍几种动物免疫的方法

  为保证动物在接种疫苗后,产生预期的免疫效果,应在使用疫苗时,对疫苗的正确使用方法,要有所了解。每一种疫苗,有其特定的免疫程序和免疫效力,选择疫苗的最佳接种途径,弱毒苗应尽量模仿自然感染途径接种,灭活苗均应注射(皮下、肌肉)。要做到方法正确、操作规范。  (一)家禽的免疫接种方法  家禽接种的途径

免疫缺陷动物的品种介绍

在上一期学习了疾病动物模型的基本简介,包括模型的意义,应用及分类等。免疫缺陷动物是一种先天免疫功能缺陷的动物,它的出现开创了肿瘤学、免疫学新的里程碑。同样它归属于疾病动物模型,在生命医学领域必不可少。本期内容:免疫缺陷动物。一、免疫缺陷动物简介概念:免疫缺陷动物(Immunodeficiency a

抗原免疫动物制备血清,常用动物有哪些

抗原免疫动物制备血清,常用动物有哪些抗原注射进入动物体内后,因为不是一个单独的分子,会随血液循环输送到各处,也就会接触不同的免疫细胞。有些还会被抗原提呈细胞再加工。所以最后的结果是很多个免疫细胞都会接触到。一个抗原分子也有很多抗原表位。每个表位理论上都有能力激活一个B细胞转化为浆细胞。所以体内最后针

简述单克隆抗体杂交瘤细胞的内容

  克隆化的细胞可以在体外进行大量培养,收集上清液而获得大量的单一的克隆化抗体。不过体外培养法得到的单克隆抗体有限,其不能超过特定的细胞浓度,且每天要换培养液。而体内杂交瘤细胞繁殖可以克服这些限制。杂交瘤细胞具有从亲代淋巴细胞得来的肿瘤细胞的遗传特性。如接种到组织相容性的同系小鼠或不能排斥杂交瘤的小

简述单克隆抗体的优势和局限性

  1.单克隆抗体的优点  (1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。  (2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体。  (3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如I

简述单克隆抗体技术的基本原理

  哺乳类细胞DNA合成可分为两条途径,①从头(de novo)合成途径,利用磷酸核糖焦磷酸和尿嘧啶,可被氨基蝶呤(A)阻断;②补救(salvag-e)合成途径,在次黄嘌呤磷酸核糖转化酶( HGPRT)存在下利用次黄嘌呤(H)和胸腺嘧啶(T)。  单克隆抗体技术的流程为:脾细胞和骨髓瘤细胞在聚乙二醇

简述单克隆抗体技术的冻存与复苏

  (1)杂交瘤细胞的冻存。在建立杂交瘤细胞的过程中,有时一次融合产生很多“阳性”孔,来不及对所有的杂交瘤细胞作进一步的工作,需要把其中一部分细胞冻存起来;另一方面,为了防 止实验室可能发生的意外事故,如停电、污染、培养箱的温度或CO2控制器失灵等给正在建立中的杂交瘤带来灾难,通常尽可能早地冻存一部

单克隆抗体在动物性食品检测中的应用

动物性食品中的兽药残留问题越来越受到国际社会的关注,世界各国,特别是西方发达国家加强了对国际贸易中动物性食品中兽药残留的检测。(1)β类兴奋剂类盐酸克伦特罗、莱克多巴、沙丁胺醇等可促进饲料转化率,增加瘦肉产量,作为一种非法饲料添加剂被许多专业饲养户和饲料加工企业所使用,但由于β类兴奋剂能导致心悸、头

抗体的概念、动物产生抗体的机理及单克隆抗体...(三)

单克隆抗体杂交瘤技术基本流程单克隆抗体的制备步骤1、免疫原的制备;2、免疫动物 ;选择体重18-20g BALB/C 雌性小鼠用于免疫。50-100ug抗原/只与等体积福氏完全佐剂混合,充分乳化后,经背腹部皮下多点注射及腹腔注射相结合的方式免疫,总的免疫体积0.2-0.3ml每只;间隔3周,取与

抗体的概念、动物产生抗体的机理及单克隆抗体...(二)

构成抗原的条件:一、异物性,又称为异质性或异源性正常情况下,自身组织或细胞对机体本身无免疫原性。而异种或异体物质,以及化学组成或结构发生改变的和由于某种因素而暴露的在胚胎期与免疫系统隔绝的自身物质则为良好的抗原。二、理化性状大分子物质抗原的免疫原性与其分子大小有直接关系:1、免疫原性良好的物质分子量

抗体的概念、动物产生抗体的机理及单克隆抗体...(一)

抗体的概念动物机体受到抗原物质的刺激后, 由B淋巴细胞转化为浆细胞产生的, 能与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白, 这类免疫球蛋白称为抗体(Antibody,简称 Ab)。免疫球蛋白免疫球蛋白(Immunogolobulin, 简称Ig)  是指存在于人和动物血液(血清)、组织液及其它外分泌液

“动物细胞融合与单克隆抗体”教学案例

  1.情境导入,类比学习   有趣的引入,是课堂教学成功的一半。一节课的导入恰如其分,就能使课堂气氛变得轻松、活泼,牢牢吸引学生的注意力,使其产生浓厚的兴趣和强烈的求知欲,从而活跃思维,充分发挥主观能动性。为了达到上述目的,我提前到达A3阶梯室,播放准备好的《今天我要嫁给你》的MV,MV的主人公是

简述-单克隆抗体药物在其他疾病中的应用

  单克隆抗体药物不只在肿瘤的治疗中取得了很好疗效,在其他疾病的治疗中也取得了一些疗效,例如;奥马珠单抗(omalizumab)通过与游离IgE结合而显著降低游离IgE的水平,阻断IgE与肥大细胞、嗜碱粒细胞结合,防止炎症介质的释放。可显著改善哮喘病人的症状、肺功能及生活质量,减少哮喘恶化的发作次数