单域抗体|纳米抗体|VHH文库构建

单域抗体|纳米抗体|VHH文库构建

单域抗体，也称为VHH（Variable domain of heavy chain of HCAb）抗体或纳米抗体，是一种小型抗体分子。与传统抗体相比，VHH具有更小的分子尺寸、更高的稳定性和更易于工程化的特点，具有广泛的生物医学应用潜力。单域抗体文库的构建是开发和优化这些抗体的关键步骤之一。 一

羊驼VHH－SingleB®纳米抗体快速发现案例分享

纳米抗体（nanobody, Nb），即重链抗体VHH（variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody）——骆驼体内存在着天然缺失轻链的重链抗体(heavy-chain antibody, HCAb)，克隆其可变区而得到的只由一个重链可变

电转化连接物及构建抗体文库

实验概要本实验通过电转化连接物，构建了抗体文库。主要试剂1. SOC培养基(将20g细菌培养用胰蛋白胨、5g酵母提取物及0.5g NaCl溶于950ml水中。加入10m1 250mmol/L KCl，5mol/L NaOH调整pH至7.0并加入去离子水至IL。高压灭菌。手感变凉后，再加入5m

纳米抗体制备新平台：羊驼VHH－SingleB®快速发现

羊驼等骆驼科动物体内天然存在缺失轻链及重链CH1结构但完全保留抗原结合活性的重链抗体（HCAb），其中特异性结合抗原的重链可变区称为单域抗体（sdAbs），即纳米抗体（Nanobody），简称VHH，是最小单元抗原结合片段。纳米抗体集传统抗体与小分子药物的优点于一体，并在诸多方面克服了传统抗体的缺陷

抗原抗体反应抗体基因文库

　　抗体基因文库（antibody recombination library）是将不同的重链和轻链基因随机组合，克隆到合适的表达载体中，在原核细胞表达不同的抗体，形成一个抗体库，从这个抗体库中，用抗原可以筛选到相应的抗体基因。抗体基因来源于杂交瘤细胞或动物B细胞（免疫或未免疫）的DNA和mRNA。

什么是纳米抗体？

1993年，比利时科学家Hamers-Casterman及其团队首先报道了在骆驼科动物（骆驼，羊驼及其近亲物种）血液中发现的一种缺失轻链的特殊抗体，即重链抗体。和普通抗体相比，它只包含一个重链可变区（VHH）和两个常规的CH2与CH3区（图一）。克隆其可变区，可以得到只有重链可变区组成的单域抗体，称

抗体的结构域

　　Ig分子的两条重链和两条轻链都可折叠成数个球形结构域(domain)，每个结构域行使其相应的功能。轻链有VL和CL两个结构域；IgG、IgA和IgD的重链有VH、CH1、CH2和CH3四个结构域；IgM和IgE的重链有五个结构域，即多一个CH4结构域。每个结构域由约110个氨基酸组成，氨基酸序列

日本VHH抗体新冠治疗方案取得动物实验进展

　　日本北里研究所和花王公司16日宣布，利用VHH抗体治疗感染新冠病毒小鼠的实验取得成功，意味着以经鼻给药方式来实施这一新冠疗法的方案朝着临床应用迈进一大步。　　骆驼体内存在天然的缺失轻链的重链抗体，克隆其可变区可以得到只有重链可变区组成的单域抗体，称为VHH，也称作“纳米抗体”。　　北里研究所和花

日本VHH抗体新冠治疗方案取得动物实验进展

　　日本北里研究所和花王公司16日宣布，利用VHH抗体治疗感染新冠病毒小鼠的实验取得成功，意味着以经鼻给药方式来实施这一新冠疗法的方案朝着临床应用迈进一大步。　　骆驼体内存在天然的缺失轻链的重链抗体，克隆其可变区可以得到只有重链可变区组成的单域抗体，称为VHH，也称作“纳米抗体”。　　北里研究所和花

简述抗体的结构域

　　Ig分子的两条重链和两条轻链都可折叠成数个球形结构域(domain)，每个结构域行使其相应的功能。轻链有VL和CL两个结构域；IgG、IgA和IgD的重链有VH、CH1、CH2和CH3四个结构域；IgM和IgE的重链有五个结构域，即多一个CH4结构域。每个结构域由约110个氨基酸组成，氨基酸序列

抗体的结构域介绍

Ig分子的两条重链和两条轻链都可折叠成数个球形结构域(domain)，每个结构域行使其相应的功能。轻链有VL和CL两个结构域；IgG、IgA和IgD的重链有VH、CH1、CH2和CH3四个结构域；IgM和IgE的重链有五个结构域，即多一个CH4结构域。每个结构域由约110个氨基酸组成，氨基酸序列具有

cDNA文库构建

cDNA文库[原理]：cDNA文库不同于基因组文库，被克隆DNA是从mRNA反转录来源的DNA。CDNA组成特点是其中不含有内含子和其他调控序列。从而做cDNA克隆时应是先从获得mRNA开始，在此基础上，通过反转录酶作用产生一条与mRNA相互补的DNA链，然后除掉mRNA，以第一条DNA链为模板复制

cDNA文库构建

cDNA文库构建可以：（1）用于分离全长基因进而开展基因功能研究；（2）筛选目的基因并直接用于表达；（3）提供构建分子标记连锁图谱的所用探针。实验方法原理cDNA 文库是指某生物某发育时期所转录的全部 mRNA 经反转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。经典 cDNA 文库构建

cDNA文库构建

cDNA文库构建             实验方法原理 cDNA 文库是指某生物某发育时期所转录的全部 mRNA 经反转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。

cDNA文库构建

实验方法原理 cDNA 文库是指某生物某发育时期所转录的全部 mRNA 经反转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。经典 cDNA 文库构建的基本原理是用 Oligo(dT) 作逆转录引物，或者用随机引物，给所合成的 cDNA 加上适当的连接接头，连接到适当的载体中获得文库。其基

纳米抗体和传统抗体的优劣对比

纳米抗体的优势

和传统抗体相比，纳米抗体并非仅以小取胜，它有着多方面的优势：（1） 体积较小，仅为普通抗体的十分之一。因为体积小，它在动物组织体内的穿透力更强，比如，它可以通过人体的脑组织，可以达到高密度的肿瘤内部，这些都是普通抗体做不到的。纳米抗体的小体积优势，让人们可以通过它来治疗某些肿瘤或脑部疾病。（2） 效

cDNA－文库的构建

此经典方案建立在 Gubler-Hoffman 法（Gulber-Hoffman 1983) 之上，分为六个阶段。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）上册，作者：黄培堂。实验材料λ噬菌体臂大肠杆菌菌株用于λ噬菌体的包装抽提物试剂、试剂盒放线菌素 D二硫苏糖醇EDTATris-ClMgCl2反转录酶

cDNA－文库的构建

            实验材料 λ噬菌体臂 大肠杆菌菌株 用于λ噬菌体的包装抽提物 试剂、试剂盒 放线菌素 D

抗体筛选技术汇总

　　近年来，生物药的市场需求逐年扩容，其中抗体药物因其靶向性好，治疗效果显著，在生物药中占据着举足轻重的地位，目前已经进入了抗体药物发展的黄金时代。随着抗体药的需求越来越大，抗体筛选技术的发展也是日新月异，目前应用较普遍的有杂交瘤技术、抗体文库筛选技术、纳米抗体技术和转基因小鼠抗体筛选技术。其中抗体

全人抗体小鼠RenMab、RenLite和RenNano的应用领域区别

 RenMabRenMab小鼠在新药研发中的应用：全人源单克隆性抗体RenMab是百奥赛图的全人抗体小鼠。如果您是抗体小白，简单地说就是可以产生人抗体的小鼠。全人抗体小鼠已经被广泛应用于治疗性抗体研发的方方面面，基本上各大跨国药企都有自己的全人抗体小鼠技术平台，比如安进公司的Xenomouse，再生

Proteintech收购纳米抗体巨头

  北京时间2020年10月15日，传统抗体标杆生产商Proteintech Group 正式宣布，全资收购德国企业ChromoTek。后者是羊驼单域抗体（也称为纳米抗体）的知名制造商，致力于纳米抗体的研发和应用推广，拥有多项世界领先的纳米抗体开发技术。 本次收购拓展了Proteintech的全

文库甘油储存料中噬菌体抗体的制备

实验概要本实验从文库甘油储存料中制备了噬菌体抗体。主要试剂1. 2×TY/amp/glu培养基2. TYE/amp/glu平板3. 含有25ug/ml卡那霉素和2％葡萄糖的TYE平板(TYE/kan/glu)4. 含100ug/ml氨苄青霉素和25ug/ml卡那霉素的2×TY培养基(2×TY/amp

文库甘油储存料中噬菌体抗体的制备

实验概要本实验从文库甘油储存料中制备了噬菌体抗体。主要试剂1. 2×TY/amp/glu培养基2. TYE/amp/glu平板3. 含有25ug/ml卡那霉素和2％葡萄糖的TYE平板(TYE/kan/glu)4. 含100ug/ml氨苄青霉素和25ug/ml卡那霉素的2×TY培养基(2×TY/amp

Biomaterials：抗Endoglin单链抗体修饰特定基因纳米脂质体

　　广西医科大学~国家生物靶向诊治国际联合研究中心赵永祥教授团队证实：利用抗Endoglin单链抗体修饰负载a1，3GT基因的纳米脂质体，将a1，3GT靶向转染到肿瘤新生血管内皮细胞，诱导表达aGal，增强其抗原性，诱发超急性排斥反应，对肺癌具有很好的抑制作用，且生物安全性好，这一策略为癌症治疗提供

纳米抗体(Nanobody)研究进展

1993年比利时科学家首次在Nature报道[1]：在骆驼血液中的抗体，有一半没有轻链，而且更让人惊喜的是，这些缺失轻链的“重链抗体” (heavy-chain antibodies, HCAbs)能像正常抗体一样与抗原等靶标紧密结合，另外不像scFv那样互相沾粘，甚至聚集成块。这种抗体只包含一个重

高灵敏度量子点与单域抗体偶联产物检测肺癌和...（一）

高灵敏度量子点与单域抗体偶联产物检测肺癌和乳腺癌肿瘤生物标志物HER2的研究文献概述：癌症即恶性肿瘤，被认为是不治之症，但如果能将癌症或恶性肿瘤在发病早期诊断出来，就可以争取时间，及早治疗，从而大大提高癌症患者的存活率。虽然免疫组织化学等方法已经广泛应用于癌症生物标志物的检测中，但该方法干扰因素多，

高灵敏度量子点与单域抗体偶联产物检测肺癌和...（二）

高灵敏度量子点与单域抗体偶联产物检测肺癌和乳腺癌肿瘤生物标志物HER2的研究图4：(a)全长抗体和(b)单域抗体(sdABs)与量子点的结合。(a)量子点（QDs）与全尺寸的抗体的结合采用碳二亚胺化学法。该方法抗体与量子点的结合是随机取向的，一些抗原结合域（红色箭头）面向纳米粒子的表面；只有暴露在外

cDNA－文库的构建2

阶段 3:cDNA 的甲基化 材料 缓冲液和溶液 将贮存液稀释到合适浓度。 氯仿 10XEcoRⅠ 缓冲液 1XEcoRⅠ 甲基化酶缓冲液（选用) 如希望，可替代步骤 1 中的 Tris-HCl,NaCl 和 EDTA。 EDTA(0.5mol/L,pH8.0) 乙醇 MgCl2(

cDNA文库的构建3

接头-衔接子与cDNA的连接8.将下列试剂加入到已削成平末端的DNA中：10×T4噬菌体DNA聚合酶修复缓冲液 2μl800~1000 ng 的磷酸化接头或衔接子 2μlT4噬菌体DNA连接酶（105 Weiss单位/ml） 1μl10 mmol/L ATP 2μl混匀后，在16℃温育8~12h。9