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NatStructMolBiol:冷冻电镜技术揭示RNA降解新通路

2013年12月15日,清华大学生命科学学院王宏伟教授课题组在《Nature》子刊《Nature Structural and Molecular Biology》在线发表题为“Visualization of Distinct Substrate Recruitment Pathways in the Yeast Exosome by EM”的研究论文,报道了不同RNA底物在蛋白复合物Exosome中的不同降解通路及结构调节机制。 在中心法则中,RNA由DNA转录而成,并经过复杂的转录后加工,成为成熟的多种RNA。细胞中的RNA质量控制,在细胞基因表达及调控的多个过程中发挥着不可缺少的作用,对细胞的发生、生长、分裂、分化、死亡等过程都具有重要意义。目前对细胞中的RNA质量控制,尤其是对RNA分子被降解的决定因素知之甚少。真核生物细胞中有多种识别及调控RNA降解的蛋白质大分子及其复合物,其中, Exosom......阅读全文

常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验——检测

实验方法原理常规聚丙烯酰胺凝胶电泳后的检测,对于不同的目的,应采用不同的检测方法。由于这种电泳方法不破坏蛋白质的生物活性,所以可选用的检测方法很多。试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液Tris-甘氨酸缓冲液贮液电极缓冲液样品缓冲液过硫醆铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液实验步骤一、早期染色方法用染料和生物大

北大学者《Nature》发表蛋白质机器动力学研究的重要研究

  来自北京大学物理学院人工微结构和介观物理国家重点实验室、前沿交叉学院定量生物学中心毛有东课题组在Nature在线发表了题为“Cryo-EM structures and dynamics of substrate-engaged human 26S proteasome(底物结合的人源26S蛋白

蛋白酶体在泛素链诱导下的变构及底物识别机制

  泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system)参与调控真核细胞内众多的生物进程,包括蛋白质质量控制、细胞周期维持、基因表达调控、应激反应等【1,2】。其功能的异常与癌症、神经退行性疾病、自身免疫病等人类重大疾病密切相关【3】。26S蛋白酶体是一种依赖于ATP的蛋白酶

全自动微生物鉴定和药敏分析仪器的探讨

 1概述       由多种病原微生物所致的传染病遍布临床各个科室,其中细菌性感染最为常见,因此抗菌药物也就成为临床应用最广泛的药物之一。在抗菌药物治愈和挽救了许多患者生命的同时,也出现了由于抗菌药物应用不合理的问题,给

全自动微生物鉴定和药敏分析仪器的探讨

1 概述由多种病原微生物所致的传染病遍布临床各个科室,其中细菌性感染最为常见,因此抗菌药物也就成为临床应用最广泛的药物之一。在抗菌药物治愈和挽救了许多患者生命的同时,也出现了由于抗菌药物应用不合理的问题,给病人健康乃至生命造成了重大影响。所以准确、及时的发现和鉴定病原体并快速做出病原学诊断和药物敏感

全自动细菌鉴定和药敏分析仪器的探讨

全自动微生物鉴定和药敏分析系统由于自动化程度高,功能齐全,体现了微生物检验的最新进展,广泛运用于临床微生物检验、卫生防疫和商检等部门。      1.    由多种病原微生物所致的传染病遍布临床各个科室,其中细

微生物鉴定药敏分析仪

微生物鉴定和药敏分析仪器是用于鉴定各种病原菌, 主要是革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、肠球菌属及真菌等,可以同时做抗菌药物敏感性试验,以帮助临床医生作出正确的病原学诊断并制定治疗方法。工作原理[1] 全自动微生物鉴定和药敏分析类仪器结合自动化、微机化和先进的微生物检验方法,可同时做细菌鉴定和药

我国揭示蛋白酶体在泛素链诱导下的变构及底物识别机制

  近日,国际学术期刊Molecular Cell 在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所国家蛋白质科学中心(上海)丛尧研究组的最新研究成果“Structural snapshots of 26S proteasome reveal tetraubiquitin-induced confor

抗体的概念动物产生抗体的机理及单克隆抗体的制备方法

  抗体的概念    动物机体受到抗原物质的刺激后, 由B淋巴细胞转化为浆细胞产生的, 能与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白, 这类免疫球蛋白称为抗体(Antibody,简称 Ab)。   免疫球蛋白   免疫球蛋白(Immunogolobulin, 简称Ig) 是指存在于人和动物血液(

抗体的概念、动物产生抗体的机理及单克隆抗体...(三)

单克隆抗体杂交瘤技术基本流程单克隆抗体的制备步骤1、免疫原的制备;2、免疫动物 ;选择体重18-20g BALB/C 雌性小鼠用于免疫。50-100ug抗原/只与等体积福氏完全佐剂混合,充分乳化后,经背腹部皮下多点注射及腹腔注射相结合的方式免疫,总的免疫体积0.2-0.3ml每只;间隔3周,取与

酶联免疫吸附试验ELISA方法简介

近二十几年来,免疫学分析方法发展很快,特别是在使用标记了的抗原和抗体的分析技术以后,使原来许多经典的分析方法在敏感性和特异性方面都不能相比。继50年代的免疫荧光(IFA)和60年代的放射免疫(RIA)分析技术之后,在70年代初期又建立了用酶来标记抗原或抗体的分析技术。由于酶的高效生物催化作用,一个酶

食品安全快速检测技术你知多少?

快速检测技术广泛用于食品安全快速检测,临床检验、检验检疫、毒品检验等公共领域。食品安全快速检测是指对食品利用便携式分析仪器及配套试剂快速得到检测结果的一种检测方式。    1、食品安全问题主要有害污染物    (1)农药,化肥:有机磷,有机氯,硝酸盐 

Western Blot详解

  Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。   本文主要通过以下几个方面来详细地介绍一下Western Blot技术:   一、原理   二、分类

清华大学王宏伟教授发表最新Nature子刊文章

  2013年12月15日,清华大学生命科学学院王宏伟教授课题组在《Nature》子刊《Nature Structural and Molecular Biology》在线发表题为“Visualization of Distinct Substrate Recruitment Pathways

ELISA试剂盒常用的几种方法

ELISA常用的几种方法是:一、双抗体夹心法测定抗原将抗原免疫种动物获得的抗体吸附于固相表面;加抗原,形成抗原-抗体复合物; 加抗原免疫第二种动物获得的抗体,形成抗体抗原抗体复合物;加酶标抗抗体(第二种动物抗体的抗体); 加底物。底物的降解量=抗原量。二、直接法测定抗原 将抗原吸附在载体表面;加酶标

Western Blot实验技术详解和常见问题解答

Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。一、原理与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被

MAPK信号通路研究工具

信号通路研究工具促细胞分裂原活化蛋白激酶(MAP kinase)是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,由于不同的细胞外刺激或介导细胞表面至细胞核的信号转导而被激活。 结合其它信号途径,它们能够改变转录因子的磷酸化状态。受控的MAPK级联反应系统参与细胞增殖和分化,但当其活力失控时会导致肿瘤。据报道,三种主要

华中科技大学PNAS发表研究新成果

  来自华中科技大学、江汉大学、埃默里大学医学院等处的研究人员证实,tau蛋白K340位点SUMO化修饰(sumoylation)可促进tau磷酸化,并抑制泛素化介导的tau降解。研究结果发表在11月5日的《美国国家科学院院刊》(PNAS)上。  华中科技大学的王建枝(Jian-Zhi Wang)教

NAT NEUROSCI转录组+蛋白组联合揭示microRNA调控靶点功能机制

  基因水平的研究发现miR-137与多种神经精神疾病存在相关性。同时,miR-137在正常的神经发生与神经发育过程中也具有重要作用。但是,miR-137的体内功能与作用机制仍然不清楚。为了揭示miR-137的功能,该研究构建了miR-137 KO动物,并对KO动物的突触可塑性、学习能力等多种神经功

转录组+蛋白组联合,揭示microRNA调控靶点与功能机制 二

4.转录组、蛋白组揭示miR-137调控底物。蛋白组结果发现:Mir137–/–组versus Mir137+/+组, Mir137+/–组versus Mir137+/+组, and Mir137–/–组versus Mir137+/–组,分别筛选到417、94和76个差异表达蛋白。这些蛋白与

中国学者J Med Chem发文: 胆红素代谢酶特异性荧光探针底物

  近日,上海中医药大学交叉科学研究院葛广波、杨凌团队研发了一种全新的胆红素代谢酶(UGT1A1,又称尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A1)特异性荧光探针底物,并将其用于人肝细胞/组织制备物中UGT1A1的活性检测以及UGT1A1抑制剂和诱导剂的高通量筛选等研究,相关工作在线发表在美国化学会著名学术刊物

工业微生物产生菌的分离筛选(3)

第三节   微生物的分离经富集培养以后的样品,目的微生物得到增殖,占了优势,其他种类的微生物在数量上相对减少,但并未死亡。富集后的培养液中仍然有多种微生物混杂在一起,即使占了优势的一类微生物中,也并非纯种。例如同样一群以油脂为碳源的脂肪酶产生菌,有的是细菌,有的是霉菌,有的是芽孢

工业微生物产生菌的分离筛选(3)

第三节   微生物的分离经富集培养以后的样品,目的微生物得到增殖,占了优势,其他种类的微生物在数量上相对减少,但并未死亡。富集后的培养液中仍然有多种微生物混杂在一起,即使占了优势的一类微生物中,也并非纯种。例如同样一群以油脂为碳源的脂肪酶产生菌,有的是细菌,有的是霉菌,有的是芽孢

【共享】酶切原理及步骤

酶切基础知识DNA酶切一般分为质粒直接酶切和PCR产物酶切第一节 DNA酶切及凝胶电泳      一.DNA的限制性内切酶酶切分析  限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在

张宏Cell子刊发文 解析自噬降解

  12月17日,中国科学院生物物理研究所张宏课题组和日本微生物化学所Nobuo N. Noda课题组合作,在国际刊物《分子细胞》(Molecular Cell)上,在线发表了题为Structural basis of the differential function of the two C.

农药残留检测相关知识

一、农药分类 农药是用于防治危害农作物及农副产品的病虫害、杂草及其他有害生物的化学药剂的统称。其分类方法有多种,常见的几种分类如下: 1、根据防治对象的不同,分为杀虫剂、 螨剂、杀菌剂、除草剂、杀鼠剂等。常将防治害虫的称为杀虫剂,防治红蜘蛛的称为杀螨剂,防治作物真菌、细菌及病毒的称为杀菌剂,防治杂

农药残留仪测试要点

一、农药分类 农药是用于防治危害农作物及农副产品的病虫害、杂草及其他有害生物的化学药剂的统称。其分类方法有多种,常见的几种分类如下: 1、 根据防治对象的不同,分为杀虫剂、杀螨剂、杀菌剂、除草剂、杀鼠剂等。常将防治害虫的称为杀虫剂,防治红蜘蛛的称为杀螨剂,防治作物真菌、细菌及病毒的称为杀菌剂,防治杂

研究提出结晶纤维素降解新模式

  纤维素的降解主要依靠细菌和真菌等微生物分泌纤维素酶完成。一般来说,纤维素酶按照其催化功能可分为3大类:外切-β-1,4-葡聚糖酶(exo-β-1,4-glucanases/cellobiohydrolases),内切-β-1,4-葡聚糖酶(endo-β-1,4-glucanases)和β-葡萄糖

工业微生物产生菌的分离筛选(三)

经富集培养以后的样品,目的微生物得到增殖,占了优势,其他种类的微生物在数量上相对减少,但并未死亡.富集后的培养液中仍然有多种微生物混杂在一起,即使占了优势的一类微生物中,也并非纯种.例如同样一群以油脂为碳源的脂肪酶产生菌,有的是细菌,有的是霉菌,有的是芽孢杆菌,有的不产芽孢,有的生产能力强,有的生产

工业微生物产生菌的分离筛选(三)

经富集培养以后的样品,目的微生物得到增殖,占了优势,其他种类的微生物在数量上相对减少,但并未死亡.富集后的培养液中仍然有多种微生物混杂在一起,即使占了优势的一类微生物中,也并非纯种.例如同样一群以油脂为碳源的脂肪酶产生菌,有的是细菌,有的是霉菌,有的是芽孢杆菌,有的不产芽孢,有的生产能力强,有的生产