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BioTechniques:牛凝血酶提高PCR的效率和特异性

成功的PCR都是相似的,而不成功的PCR却有各种各样的原因。于是,人们都希望找到普遍适用的PCR增强剂。首都师范大学、北京市疾病预防控制中心和清华大学的研究人员发现,牛凝血酶(BT)在防止引物二聚体形成和增强PCR产物形成上极为有效。这项成果发表在《BioTechniques》12月刊上。 PCR是许多领域的核心技术之一,比如疾病诊断和法医鉴定。尽管这种技术被广泛使用,但有时还是困难重重,特别是在扩增低拷贝、富含GC或复杂的样品时。随着新技术的发展,PCR也面临新的问题。例如,在适体(aptamer)的选择过程中观察到PCR偏向,而纳米材料的使用虽然能大幅提高PCR的特异性或灵敏度,但也可能抑制PCR。 为了解决这些问题,人们开始采用各种PCR添加剂和增强剂来提高PCR的产量、特异性和一致性。凝血酶是一种众所周知的丝氨酸蛋白酶,可将可溶性纤维蛋白原转化为不可溶的纤维蛋白,并催化其他许多与凝血相关的反应。在这项研究中,研究......阅读全文

凝血实验的标准化问题

摘要 对ICSH、ICTH或美国国家临床生物化学委员会(NCCLS)等国际以文件形式公布的有关凝血酶原时间(PT)、活化的部分凝血活酶时间(APTT)和纤维蛋白原测定等三项实验的标准化及其重要性作了简单叙述。关键词: 凝血酶原时间 活化的部分凝血活酶时间 纤维蛋白原 标准化由于血栓与止血实验的特殊性

凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间APTT等测定

摘要:对ICSH、ICTH或美国国家临床生物化学委员会(NCCLS)等国际以文件形式公布的有关凝血酶原时间(PT)、活化的部分凝血活酶时间(APTT)和纤维蛋白原测定等三项实验的标准化及其重要性作了简单叙述。 关键词:凝血酶原时间 活化的部分凝血活酶时间 纤维蛋白原 标准化   由于血栓与止血

流式细胞仪实验方法

一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:网站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.CBA 四、血小板

重磅!| 2018年度中国科学十大进展揭晓

  第14届“中国科学十大进展”遴选活动由科技部基础研究管理中心举办,《中国基础科学》《科技导报》《中国科学院院刊》《中国科学基金》和《科学通报》五家编辑部参与推荐科学研究进展,经两院院士、973计划顾问组和咨询组专家、973计划项目首席科学家、国家重点实验室主任、部分国家重点研发计划负责人等专家学

血细胞分离技术之大容量离心机

       血细胞分离技术大容量离心机采血  (一)材料与试剂1.抗凝剂(1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其钠盐或钾盐,它能阻止凝血酶原转化为凝血酶,进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白,从而阻止血液凝固。常

血细胞分离技术

采血 (一)材料与试剂 1.抗凝剂 (1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其钠盐或钾盐,它能阻止凝血酶原转化为凝血酶,进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白,从而阻止血液凝固。常用的肝素溶液浓度为1 000U/ml,市售肝素多为100U~126U/mg。 (2)乙二胺四乙酸(EDTA):是

大容量离心机分离血细胞的技术

  (一)材料与试剂   1.抗凝剂   (1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其钠盐或钾盐,它能阻止凝血酶原转化为凝血酶,进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白,从而阻止血液凝固。常用的肝素溶液浓度为1 000U/ml,市售肝素多为100U~126U/mg。   (2)乙二胺四乙酸(EDTA):是