液相色谱法检测饮料品中食用合成色素

近年来，饮料品安全问题越来越引起人们的关注，尽管诸多大型品牌饮料制品生产商均有被曝出卫生安全问题，但各大商店超市售卖的饮料仍品种类繁多，色彩各异，不禁让人担心其鲜亮颜色背后隐藏的有机合成色素添加问题。

    食用色素对人体有危害，主要是由于食用合成色素多以苯、甲苯、萘等化工产品为原料，经过磺化、硝化、偶氮化等一系列有机反应而成，有些色素长期低 剂量摄入，也存在致畸、致癌的可能性。尽管相关法律已明令禁止人工合成使用色素的使用，但仍有不法分子在利欲驱使下，突破允许使用品种、范围和数量，滥 用、重剂量使用色素，使消费者的健康受到食品安全问题的威胁。

    鉴于食用合成色素的不安全性，国家也加强了对合成色素的监管，制订了食品添加剂使用标准（GB 2760-2011），另外对合成色素的检测也非 常重要，国家标准食品中合成着色剂的测定标准（GB/T 5009.35-2003)中规定了对新红、柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、赤藓红、亮蓝、靛 蓝这8中合成色素的检测方法，主要是高效液相色谱仪检测饮料品中食用合成色素。
 
检测仪器：高效液相色谱仪（配备输液泵，CO-1000柱温箱，紫外检测器，N2000色谱工作站）、氮吹仪、溶剂过滤器、固相萃取仪
 
标准溶液：合成色素标准使用液用日落黄、柠檬黄等1.00mg/mL标准溶液，加水稀释20倍,经0.45μm滤膜过滤,配成50.0μg/mL的合成色素标准使用液。
 
固相萃取柱净化：SPE小柱：Cleanert PWAX(150mg/6mL)Cleanert PA 聚酰胺柱(1g/6mL)取以上两种固相萃取柱及上述提取液至固相萃取仪中，完成SPE净化过程：6mL甲醇，6mL水(pH值6~7)；加样 10mL；6mL水(pH=4)、6mL甲醇-甲酸(6：4)、6mL水(pH值6~7)淋洗；通入空气吹干小柱5min，6mL 2%氨化甲醇洗脱并接 收，收集液于50℃氮吹仪下吹干，用1mL水定容，过0.45μm水系滤器过滤，待测。
 
样品制备：称取10g样品放入100mL烧杯中，含二氧化碳的样品加热去除二氧化碳；称取20.0g样品溶液放入分液漏斗中，加2mL盐酸、10mL三正 辛胺正丁醇溶液（5%），振摇提取合成色素，重复提取至无色，约3～4次。合并提取的合成色素，用饱和硫酸钠溶液10mL洗2次.将提取的合成色素转移至 另一分液漏斗中，加50mL正己烷混匀，加氨水提取3次，每次5mL,合并氨水层，加乙酸调成中性，水浴加热蒸发至近干，加水定溶至5mL。0.45μm 过滤,取10μL进高效液相色谱仪。
 
色谱条件：
    色谱柱：C18(4.6mm×250mm,10μm)；
    流动相：甲醇；
    梯度洗脱：甲醇︰20%～35% 3min；35%～98% 9min；98%  6min.
    紫外检测器：254nm
    流速：1ml/min.
    进样量：10μL。
 
色谱图：