土壤速效磷的测定

一、目的和要求 

掌握比色法测定土壤速效磷的方法，了解土壤中磷素形态及其土壤供磷能力与土壤速效磷的关系。掌握土壤速效磷的浸提，浸提液的处理，标准曲线制作，显色，比色，计算。

二、内容与原理

酸性土壤中的磷主要是以Fe—P，A1—P的形态存在，利用氟离子在酸性溶液中络合Fe³⁺和Al³⁺的能力，可使这类土壤中比较活性的磷酸铁铝盐被陆续活化释放，同时由于H⁺的作用，也能溶解出部分活性较大的Ca—P，然后用钼锑抗比色法进行测定。

三、主要仪器及试剂配制

仪器：塑料杯，往复式振荡机，分光光度计或光电比色计

试剂： 

（1）0.03molL^-1NH₄F—0.025 molL^-1HCl浸提剂

称取1.11克NH₄F溶于800毫升水中，加1.0molL^-1HCl25毫升，然后稀释至1升，贮于塑料瓶中，其它试剂同前法。

（2）钼锑抗试剂

    称取酒石酸锑钾（KSbOC₄H₄O₆）0.5克，溶于100毫升水中，制成5％的溶液。

另称取钼酸铵20克溶于450毫升水中徐徐加入208.3毫升浓硫酸，边加边搅动，再将0.5％的酒石酸锑钾溶液100毫升加入到钼酸铵液中，zui后加至1升，充分摇匀，贮于棕色瓶中，此为钼锑混合液。

    临用前（当天）称取1.5克左旋抗坏血酸溶液于100毫升钼锑混合液中，混匀。此即钼锑抗试剂。（有效期24小时，如贮于冰箱中，则有效期较长。）

    （3）磷标准溶液

称取0.439克KH₂PO₄（105℃烘2小时）溶于200毫升水中，加入5毫升浓H₂SO₄，转入1升量瓶中，用水定容，此为100 mgkg^-1磷标准液，可较长时间保存。取此溶液稀释20倍即为5 mgkg^-1磷标准液，此液不宜久存。

四、操作方法与实验步骤

1、称取通过1毫米筛孔的风干土样品5克（精确到0.01克）于150毫升塑料杯中，加入0.03molL^-1NH₄F——    0.025 molL^-1HCl浸提剂50毫升，在20—30℃条件下振荡30分钟，取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于塑料杯中，同时作试剂空白试验。

    2、吸取滤液10—20毫升于50毫升容量瓶中，加入10毫升0.8M H₃BO₃，再加入二硝基酚指示剂2滴，用稀HCl和Na0H液调节pH至待测液呈微黄，用钼锑抗试剂5毫升显色，并用蒸馏水定容，摇匀，在室温高于15℃的条件下放置30分钟，用红色滤光片或660nm波长的光进行比色，以空白溶液的透光率为100（即光密度为0），读出测定液的光密度，在标准曲线上查出显色液的磷浓度（mgkg^-1）。

3、标准曲线制备：

吸取含磷（P）5mgkg^-1的标准溶液0、1、2、3、4、5、6毫升，分别加入50毫升容量瓶中，加入10毫升0.8M H₃BO₃，再加入二硝基酚指示剂2滴，用稀HCl和Na0H液调节pH至待测液呈微黄，再加入钼锑抗显色剂5毫升，摇匀，定容即得0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mgkg^-1磷标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值，在方格座标纸上以吸收值为纵座标，磷mgkg^-1数为横座标，绘制成标准曲线。

五、作业

根据以下公式计算土壤中速效磷的含量

                      显色液磷mgkg^-1数×显色液体积×分取倍数

   土壤中速效磷mgkg^-1＝—————————————————――――――――—————————

                                      烘干土重（克）

   显色液磷mgkg^-1数：从工作曲线查得显色液的磷mgkg^-1数

   显色液体积：50毫升

          浸提液总体积（50毫升）

分取倍数＝————--------—————————

            吸取浸出液毫升数

六、参考指标

        土壤速效磷     　    mgkg^-1等级

         ＜3                 很低

         3—7                 低

         7—20                中等

          >20                 高