(一)体液葡萄糖的检测
酶法为推荐使用的测定方法(如:己糖激酶法或葡萄糖氧化酶法)。
1. 标本收集和贮存
大多数临床实验室采用血浆或血清测葡萄糖浓度,而大多数床旁测定葡萄糖的方法使用的是全血。使用不同的标本应采用不同的参考值。
室温下,血细胞中进行的糖酵解使血中葡萄糖减少,在获得标本后应尽快测定。
通过向标本中加碘乙酸钠或氟化钠可抑制糖酵解作用,使血葡萄糖在室温下稳定3天。
2. 已糖激酶法
(1)原理:在有已糖激酶(hexokinase)和Mg2+存在下,葡萄糖被ATP磷酸化为6-磷酸葡萄糖。在NADP+参与下,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶将6-磷酸葡萄糖氧化为6-磷酸葡萄糖酸,同时NADP+转变为NADPH+H+。NADPH生成量与标本中葡萄糖含量成正比,可以在340 nm波长监测NADPH吸光度变化,定量葡萄糖。用从酵母中获得的G-6-PD,需NADP+作为辅因子。如使用细菌来源的G-6-PD,则以NAD+作为辅因子,NADH的生成量也在340nm测定。
(2)评价:该法准确度和精密度高,特异性高于葡萄糖氧化酶法,适用于自动化分析,为葡萄糖测定的参考方法。轻度溶血、脂血、黄疸、氟化钠、肝素、EDTA和草酸盐等不干扰本法测定。
3. 葡萄糖氧化酶法
(1)原理:葡萄糖氧化酶(glucose oxidase, GOD)催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸和过氧化氢(H2O2),再加入过氧化物酶和色原性氧受体(如联大茴香胺,4-氨基安替比林偶联酚),生成有色化合物,比色定量。
(2)评价:GOD高特异性催化β-D-葡萄糖。而葡萄糖α和β构型各占36%和64%。要使葡萄糖完全反应,必须使α-葡萄糖变旋为β-构型。某些商品试剂中含有变旋酶,可加速变旋过程。也可延长孵育时间,通过自发性变旋来转化。过氧化物酶的特异性远低于GOD。尿酸、维生素C、胆红素、血红蛋白,四环素和谷胱甘肽等可抑制呈色反应(通过与H2O2竞争色素原受体),用Somogyi过滤可以除去大部分干扰物质。
4. 尿葡萄糖测定
尿糖检测快速、廉价和无创伤性,适用于大规模样本的筛选。
(二)酮体的检测
酮体(ketone bodies)由乙酰乙酸、β-羟丁酸和丙酮组成。最主要的来源为游离脂肪酸在肝脏的氧化代谢产物。
由于尿酮体检测的方便性,已广泛用于1型糖尿病的病情监测。
尿酮体测定:Acetest和Ketostix法都适于对尿酮体的测定。其特异性和灵敏度与测定血清时相同。
(三)乳酸和丙酮酸的检测
(四)糖化蛋白的检测
糖基化是指通过非酶促作用将糖基加到蛋白质的氨基酸基团上。测定糖化蛋白(glycated protein)可为较长时间段的血糖浓度提供回顾性评估,而不受短期血糖浓度波动的影响。
1. 糖化血红蛋白
糖化Hb的形成是不可逆的,其浓度与红细胞寿命(平均120天)和该时期内血糖的平均浓度有关,不受每天葡萄糖波动的影响,也不受运动或食物的影响,所以糖化Hb反映的是过去6~8周的平均血糖浓度,这可为评估血糖的控制情况提供可靠的实验室指标。
糖化Hb的测定方法的原理有多种:①根据电荷差异:离子交换层析,高效液相层析(HPLC),电泳和等电聚焦电泳:②根据结构差异:亲和层析和免疫测定法;③化学分析:比色法、分光光度法。
2.果糖胺
除了血红蛋白,葡萄糖也可通过非酶促糖基化反应与其他蛋白(如清蛋白,膜蛋白,晶状体)结合形成酮胺(ketoamine)。由于清蛋白的产生比血红蛋白快(清蛋白半寿期约为20天),所以糖化清蛋白的浓度反映的是近2~3周血糖的情况,
3.糖化终末产物
(五)尿清蛋白排泄试验
糖尿病患者有很高的肾脏损害风险。大约1/3的1型糖尿病者最终发展为慢性肾衰。常规检查发现尿清蛋白排泄(urinary albumin excretion, UAE)的增加,持续性尿蛋白定性阳性(相当于尿清蛋白排泄率≥200μg/min),提示已有明显的糖尿病性肾病。
(六)胰岛素与胰岛素抗体的检测
1.胰岛素测定
2. 胰岛素抗体
胰岛素抗体检测方法均为免疫学方法,如RIA、免疫亲和层析法等。
(七)胰岛素原的检测
(八)C-肽的检测
测定C肽比胰岛素有更多优点。因为肝脏的代谢可以忽略,所以与外周血胰岛素浓度相比,C肽浓度水平可更好地反映β细胞功能。C肽不受外源性胰岛素干扰且不与胰岛素抗体反应。
(九)胰高血糖素的检测
据最新一期《先进功能材料》报道,一个国际科研团队开发出一种治疗慢性伤口的有效方法,不需要使用抗生素,而是使用一种电离气体来激活伤口敷料。研究人员认为,新方法在解决抗生素耐药性病原体方面取得了重大进步,......
法国科研团队在巴黎内克尔儿童医院开展联合研究,发现了一种血液标记物,可有效预测Ⅱ型糖尿病患者患动脉粥样硬化的风险。该研究结果已发表在近期的《循环研究》杂志上。法国科学家对循环于血液中的一种白细胞群体—......
·研究团队将该系统应用于中国和印度的真实临床流程,结果显示,DeepDRPlus系统可以识别高、低风险人群,为患者提供个性化筛查间隔和管理策略,可将糖尿病患者的平均筛查间隔从1年延长至近3年而几乎不发......
饮食因素在2型糖尿病的预防策略中起着关键作用,但若仅关注单个食物或营养素,会对饮食与2型糖尿病的关系理解不到位。因此,有必要研究饮食模式与2型糖尿病的关联。2023年12月18日,中国疾病预防控制中心......
发表在《JAMA·内科学》上的这篇论文,则是计划中针对2型糖尿病人群的一个小范围结果。计划中,参与者能够获得一定的健康食材,并得到健康指导和疾病教育,但是遗憾的是,随访1年后,虽然参与者的健康意识得到......
中国疾病预防控制中心、国家卫健委的研究人员在营养学领域国际著名期刊"Nutrients"上发表了一篇题为"GeographicalDistributionofDietar......
12月20日,国家卫生健康委发布推荐性卫生行业标准《妊娠期糖尿病妇女体重增长推荐值标准》的通告。原文如下:现发布推荐性卫生行业标准《妊娠期糖尿病妇女体重增长推荐值标准》,编号和名称如下:WS/T828......
一支丹麦研究团队通过对皮下白色脂肪组织进行蛋白质组学分析,发现了与个体体重、2型糖尿病(T2D)状况、运动训练以及相关的临床或代谢特征相一致的蛋白质变化。正如他们在周三的《ScienceAdvance......
研究人员通过包括基因表达、遗传风险和功能数据在内的分析,已经开始揭示2型糖尿病(T2D)背后的基因调控网络,强调了转录因子编码基因RFX6的关键作用。《自然》杂志上周一报道称,研究人员依赖于细胞分类的......
2型糖尿病是一种进行性慢性疾病,被公认为全球最常见的代谢紊乱之一。目前全球成年糖尿病患者人数为5.37亿,预计到2045年将达到7.83亿。步行,或是预防2型糖尿病的最简单廉价的方法。近日,发表在《英......