一滴血做流式？guava微流式！

完成一次常规流式实验，至少要保证单个样品1×106个细胞的上样量（100μl）。这还不包括梯度样品、平行对照、重复实验，等等。难道需要开个细胞工坊整天生产细胞吗？不，在实验仪器日益精密化、小型化，实验方法日益自动化、人性化的今天，一滴血（等同于10μl血液的细胞量）做流式已经不再是梦想，1,000,000个细胞至少可以完成10个实验！

一滴血做流式不再是梦想，致力于开发细胞分析领域前沿技术的默克密理博已成功突破这一瓶颈！2011年Journal of Immunological Methods刊登了University of Houston & University Of Texas Health Science Centre最新研究成果：采用CD115 marker鉴定10μl小鼠血样中的单核细胞。文中对比了默克密理博guava微流式细胞分析平台的效能，最终得出结论10μl 样本量为该平台分析单核细胞亚型的下限。

“一滴血做流式”的方法如下：

1.   静脉采血，肝素或EDTA抗凝；

2.  在试管中加入10μl CD8-FITC/CD4-PE/CD3-PECY5 抗体；

3.  向试管内加入10μl 抗凝全血（约1×105细胞）混匀试剂和全血；

4.  室温（18-25℃）避光孵育20min；

5.  加入180μl 1X 红细胞裂解液；

6.  室温（18-25℃）避光孵育15min；

7.  使用微流式细胞分析仪获取结果。

结果可见：通过CD3,CD4,CD8的检测指标对全血样本中T淋巴细胞进行正确区分，并同时报告Th细胞和Tc细胞的绝对计数结果。证明10μl 的样本借助“guava微流式”技术同样能够完成流式检测，并且所获得的数据具有统计学意义，准确区分了T淋巴细胞各个亚群。

参考文献：
Breslin., W.L., et al., Mouse blood monocytes: Standardizing their identification and analysis using CD115. Journal of Immunological Methods, 2011.