以凝血酶适体(aptamer) 为例,利用适体和核酸外切酶特性,通过定量PCR 扩增建立一种高灵敏的蛋白质检测方法. 首先合成3 段寡核苷酸序列即凝血酶适体探针,上游连接子和下游连接子. 将适体探针与凝血酶温育结合后,再加入核酸外切酶I 降解未能结合的探针. 接着将保护下来的探针与连接子杂交、连接和对连接产物进行定量PCR. 分别建立连接产物标准品浓度与Ct 值的标准曲线和凝血酶浓度与连接产物浓度的标准曲线,通过定量PCR 对凝血酶进行定量。.
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