实验概要
本人总结的多糖提取前AIR制备过程
实验步骤
AIR （alcohol insoluble residue）提取
1）新鲜收取的植物在蒸馏水中清洗以除去培养基等物质，后冻干。
2）将冻干的样品在液氮中研磨成粉末。
3）AIR （alcohol insoluble residue）制备
浮萍、拟南芥叶及根中淀粉含量较高，需要先除去其中淀粉。拟南芥、杨树、芒草等茎秆不需要除淀粉这一步。
Note：不同组织体积不一样，一般液体是粉末体积的3-4倍 | ||||
80%乙醇 | 80oC | 1h | 1次 | 4000 g 5 min |
氯仿：甲醇=2:1 | 37oC | 2h | 2次 | 过滤 |
65% 乙醇 | 37oC | 30 min | 2次 | 4000 g 5 min |
80% 乙醇 | 37oC | 30 min | 2次 | 4000 g 5 min |
100%乙醇 | 37oC | 30 min | 2次 | 4000 g 5 min |
100%丙酮 | 37oC | 2h | 2次 | 4000 g 5 min |
70oC 真空干燥 | ||||
根据实验室已有的淀粉降解法降解淀粉，加入5倍体积无水乙醇，4oC沉淀过夜，离心，常规干燥，即为AIR。 |
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