两种前处理方法结合液质测定咸鱼中16种有机磷农药残留

本文建立了咸鱼中 16 种有机磷农药残留的液相色谱串联质谱分析方法，线性范围在 0.5 ~ 20 ng/mL 之间，线性相关系数在 0.991 ~ 0.999 之间。此外，还对两种前处理方法进行了考察，分别使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 试剂盒以及国标前处理方法对咸鱼进行前处理，QuEChERS 方法回收率在 55.45% ~ 100.37% 之间，国标前处理方法回收率在 46.62% ~108.32%。结果表明，QuEChERS 方法具有操作简便快速、准确率高、重复性好等优点。

食品的质量安全近年来在我国引起了高度重视。咸鱼是一种腌制食品，在加工过程中不法商贩为了防治蚊蝇、蛆虫等滋生会向咸鱼喷洒、浸泡有机磷农药，这严重威胁广大人民的健康。因此，建立准确、快速测定此类食品中有机磷残留的检测方法具有重要意义。

国标中关于肉制品中有机磷农药的前处理方法繁琐，且除脂和净化效果不理想。而 QuEChERS（Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe）方法是近年来国际上最新发展起来的一种用于农产品农药残留检测的快速样品前处理技术，此方法快捷简便，并且能将咸鱼样品中大量油脂去除，减少分析过程中基质干扰。因此本文采用这两种前处理方法结合液相色谱串联质谱法快速检测咸鱼中有机磷农药残留，以便对比其除脂和净化效果。

结果与讨论

液相色谱柱选择

分别使用 Poroshell 120 SB-C18 (2.1x100 mm, 2.7 µm)、ZORBAXSB-C18 (2.1 x 150 mm, 3.5 µm) 和 Atlantis T3 (2.1 x 150 mm,3.5 µm) 色谱柱对 0.5 ppb 的 16 种有机磷农药混合标准溶液进行分析。如图 1 所示，采用 Poroshell 120 SB-C18 色谱柱对 16 种有机磷农药进行分离时，色谱峰的分离效果最好，且分离时间短。

图 1. 0.5 ppb 有机磷农药混合标准溶液的 TIC 图（A，Poroshell 120 SB-C18；B，ZORBAX SB-C18；C，Atlantis T3）

样品前处理方法优化

本文分别使用国标和 QuEChERS 方法对咸鱼样品进行前处理，以便对比这两种方法的净化效果。如图 2 所示，咸鱼样品中油脂含量高，杂质成分较为复杂，国标前处理方法（黑色基线）的净化效果不理想，在空白样品 TIC 图中可以明显看到基线噪音较大；而 QuEChERS 前处理方法（红色基线）的净化效果较好，基线噪音较小。

图 2. 两种前处理方法所得空白样品 TIC 图（黑色为国标方法，红色为 QuEChERS 方法）

线性范围、相关系数和定量限

采用文中所述实验条件，依次对 0.5、1、2、5、10、20 ng/ml 的混合标准溶液进行分析，记录色谱图。以不同浓度点为横坐标 (X)，以每个浓度点下各有机磷农药特征离子峰的峰面积为纵坐标 (Y)，绘制标准曲线。如表 1 所示，本文所述方法在线性范围 0.5 - 20 ng/mL内，16 种有机磷农药的线性相关系数良好，均在 0.991-0.999 之间。通过各有机磷农药的特征离子色谱峰信噪比 S/N > 10，计算得到方法定量限 (LOQ)，如表 1 所示。

表 1. 16 种有机磷农药的线性方程和相关系数

定量限、回收率和精密度

在空白样品中分别添加浓度水平为 10、20、40 ug/kg 的混合标准溶液，做 2 次平行实验，进行方法回收率和精密度讨论。如表 2 所示，对比两种前处理方法的回收率和标准偏差可以得到，QuEChERS前处理方法的平均回收率和相对标准偏差均优于国标前处理方法，表明 QuEChERS 方法的准确率更高、重复性更好。此外，实验中发现，国标方法在旋蒸浓缩过程中，当温度超过大气压下 80 °C 时，部分有机磷农药会发生分解，导致回收率下降或显现回收率为零的状况，所以在旋蒸浓缩的时候不设任何温度。

表 2 添加回收率和精密度数据 (n=2)

结论

本文建立了咸鱼中 16 种有机磷农药残留的液相色谱串联质谱检测方法，并采用两种前处理方法对加标样品进行分析。结果表明，本文所述液相色谱串联质谱检测方法可对 16 种有机磷农药进行分离，分析效果好且分离时间短。通过对比实验可以得到，与国标前处理方法相比，QuEChERS 前处理方法的提取效率更高、净化效果更好、灵敏度更高、重现性更好，适用于咸鱼中有机磷农药残留检测的实际工作需要。