乙肝病毒血清标记物与血清HBVDNA的关系

【摘要】  目的: 探讨不同乙肝感染模式的患者与HBV-DNA定量结果进行对比分析。方法: 采用ELISA方法检测乙肝病毒血清标记物, 荧光定量PCR (FQPCR) 检测HBV-DNA, 比较二者之间的关系。结果: HBsAg、 HBeAg、 HBcAb阳性组和HBsAg、 HBeAg阳性组 HBV-DNA检出率较高, 分别为96.61%和100%。HBsAg、 HBeAg、 HBcAb阳性组HBV-DNA含量平均水平为3.86×108, HBsAg、 HBeAg阳性组HBV-DNA含量平均水平为1.73×108; HBsAg、 HBeAb、 HBcAb阳性组和HBsAg、 HBcAb阳性组检出率也较高, 达45% 以上, HBV-DNA含量平均水平分别为1.30×107和1.31×106。结论: FQPCR检测HBV-DNA能准确地反映体内的HBV真实感染和复制情况, 在乙肝的诊断和治疗中, 不能单凭两对半的检测, 同时应做HBV-DNA的定量测定。

【关键词】  HBV-DNA ELISA FQPCR

　　乙型肝炎病毒是一种严重危害人类健康的传染病,  它是由乙肝病毒（HBV）感染引起的,  我国是乙肝携带者高于人群的10%。急性乙肝中有20%会转为慢性乙肝,  进而可能发展为肝硬化和肝癌,  因此,  准确、 迅速的诊断对乙肝的治疗和预后极为重要。FQPCR技术融合了PCR技术和DNA探针杂交技术的优点,  直接探测PCR过程中荧光信号的变化,  而且整个实验过程在完全封闭的状态下进行,  不需要PCR的后处理和电泳检测,  具有快速、 准确、 特异等优点。我们对本院321例不同乙肝感染模式的患者与HBV-DNA定量结果进行了实验对比分析。

　　1  材料和方法

　　1．1  材料  321份血清标本均来自2006-01/2007-07我院门诊及住院患者。荧光定量PCR系统购自博日公司; HBV-DNA诊断试剂盒购自深圳匹基公司; HBV血清标志物ELISA诊断试剂盒购自英科新创公司。

　　1．2  方法  血清标本的采集,  采用灭菌的一次性带盖塑料管,  清晨空腹抽取静脉血5 mL,  离心分离血清,  -20℃保存,  不超过7 d进行FQPCR。

　　1．3  实验分组  用ELISA法分别对321例血清进行HBV两对半检测（血清标记物HBsAg 、 HBsAb、 HBeAg、 HBeAb、 HBcAb,  分别编号为1、 2、 3、 4、 5; (+)为阳性, (-)为阴性）,  并依据检测结果进行分组。分组如下: A:  1(+)、 3(+)、 5(+); B:  1(+)、 4(+)、 5(+);  C:  1(+)、 3(+);  D: 1(+)、 5(+) ; E: 2(+)、 4(+)、 5(+); F:  2(+)、 5(+); G:  4(+)、 5(+); H:  4(+); I: 5(+);  J:  全(-)。

　　2  结果

　　2．1  荧光定量结果判断标准  HBV-DNA定量以1×103拷贝/L为判断阳性的标准,  <1×103拷贝/L为阴性,  >1×103拷贝/L判为阳性。

　　2．2  定量结果比较  HBV感染血清标志物各组合模式与HBV-DNA定量结果的比较（表1）。

　　表1  321例ELISA检测结果与HBV-DNA定量结果的比较（略）