利用质粒pET22b + 为表达载体 ,成功构建了产 N2乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶基因工程
菌BL212pET22b + 2argE ,并考察了重组质粒的稳定性。双酶切鉴定了质粒构建正确 ,SDS2PAGE电泳证实了该菌可高效表达目的蛋白。连续传代 50 次实验表明重组质粒具有结构稳定性无选择压力连续传代时 ,质粒丢失严重;有选择压力时连续传代未发生质粒丢失现象 ,具有较好的分离稳定性。发酵过程中 ,用羧苄青霉素代替氨苄青霉素 ,质粒稳定率由 77.78%提高到 86.42%羧苄青霉素浓度为 200μ g/mL 时 ,质粒稳定率提高到 98.33%。
