人骨髓间充质干细胞的培养

人软骨损伤后，可用软骨组织工程进行软骨缺损修复。软骨可由间充质干细胞分化而来。因而，间充质干细胞的培养和分化具有重要作用。

间充质干细胞（MSC）可以2×10的5次方／cm2的密度接种于特定的培养液(低糖DMEM，含15％FBS，100u/L氨卡青霉素，100 mg／L链霉素，250 mg／L两性霉素)中，置于37℃、5％CO2和饱和湿度的孵箱内培养。3 天后更换培养液，小心弃去未贴壁细胞。以后每3天换液一次。

MSC体外扩增时，是待细胞长至铺满瓶底80％时，用0.1％胰蛋白酶和0.01％ EDTA(1:1)消化传代，再以(6～8)×10³／cm2的密度接种传代培养。以后各代均以此密度传代扩增。

一些厂家已提供间充质干细胞无血清培养基，但价格不菲。也可考虑用质量较好的胎牛血清加DMEM进行培养。

质量较高的胎牛血清会非常适合干细胞的培养。它被众多国家重点实验室和细胞典藏项目长期选择。下面这个品牌的血清供参考。

Ausbian®特级胎牛血清

Ausbian Fetal Bovine Serum，Sterile

规格：500ml/瓶    

货号：VS500T/WS500T

产品描述

Ausbian®特级胎牛血清是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段，血中含有丰富的生长发育因子，非常适合各种细胞的培养。

所有Ausbian®特级胎牛血清出厂前均应经过严格质控，并附有详细的《检测报告》，检查指标齐全，如理化检查、外源因子检查和促细胞生长能力等。

Ausbian®胎牛血清均在澳洲当地政府兽医部门的监督下从注册的出口屠场采集，符合动物协会要求。

Ausbian特级胎牛血清的优势是：

1、精选内毒素更低批次（≤3EU/ml），使细胞更健康，培养更顺利。干细胞对内毒素非常敏感，如果血清中内毒素≥3EU/ml时，干细胞很容易死亡。因此，挑选更低的内毒素，是保证实验顺利的第yi步。

2、七次无菌过滤，后三次为0.1 µm无菌过滤处理。

3、进行全面的细菌、真菌、支原体、病毒及病毒抗体检测，保证安全性。

4、提供试用服务，养细胞更放心。

5、每个批次产量为2000-3000瓶，试用满意的实验室批号优先锁定，保证大多数项目两年不需换批次，细胞试验数据稳定。

6、每年按序推出多个新鲜生产批次，平行供应，仓储稳定。

7、Viansaga的防伪标签，保证不会有假货。保证了实验的顺利，也避免了假货造成的成本损失。