人骨髓间质干细胞分离纯化及基本生物学特性研究

摘要:目的　分离纯化人骨髓间质干细胞(MSC) ,研究其基本生物学特性。方法　用比密1. 073 Ficoll 淋巴细胞分离液分离成人骨髓MSC ,体外扩增,观察细胞生长特性,流式细胞仪检测骨髓MSC 表面抗原表达及细胞周期,染色体技术分析骨髓MSC 遗传特性。结果　成人骨髓MSC 培养3 d 后有散在呈针尖状的贴壁细胞,7～10 d 后形成集落或融合呈纤维状;体外扩增原代可获得(4～6) ×105 个细胞,10 代可获得(1～5) ×1010个细胞,5～6 代以后的细胞增殖能力下降;流式细胞仪检测结果显示:CD13、CD29、CD44、CD71 表达阳性,CD3、CDl4、CD33、CD34、CD38、CD45、HLA2DR 不表达;染色体核型正常;细胞周期分析显示,G0/ G1 期:79. 48 % ,G2/M期:6. 10 % ,S 期:14. 42 %。结论　人骨髓MSC 体外具有较好的增殖更新能力,3～6 代的人骨髓MSC作为组织工程细胞具有广阔的应用前景。