慢病毒(LV)
慢病毒载体(lentivirus vector,LV)属于逆转录病毒科(Retrovidae),为 RNA病毒。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。慢病毒载体的研究发展得很快,研究的也非常深入。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达。
感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,从而达到良好的的基因治疗效果,在美国已经开展了临床研究,效果非常理想,因此具有广阔的应用前景。
优势
慢病毒与其他病毒工具比较,具有以下优势:
1) 表达时间长:慢病毒通过将外源基因整合到宿主细胞基因组上,可实现目的基因长时间稳定的表达,不随着细胞分裂传代而丢失,是细胞实验的首选;
2) 安全性高:未发现致病性,已被用于CAR-T 治疗作用于人体;
3) 免疫原性低: 直接注射活体组织不易造成免疫反应,适用于动物实验。
应用
1)将目的基因 /RNAi 基因转入难以转染的细胞,比如神经元细胞、干细胞或其它原代细胞;
2)将目的基因 /RNAi 基因转入动物组织,以期获得长期表达;
3)构建稳定表达目的蛋白 /RNAi 的细胞系,再用exvivo的方法导入动物体内;
4)基因治疗;
5)转基因动物;
6)基因敲除;
7)药物研究:构建表达受体蛋白的细胞系,研究药物的作用;
8)快速建立生产目的蛋白的细胞系,非常有前途的真核细胞表达方法。
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