发布时间:2022-04-08 16:08 原文链接: 什么是DNA的复制型?

在未受照射的细菌中,复制位点(replicating site)或生长点开始于DNA分子的起始点,并且复制点围绕环形分子半保留地发生复制。照射后,合饼应用溴尿嘧啶标记和氯化铯梯度离心的方法观察到复制型与正常不同。在此方法中,用3H一胸腺嘧啶预先标记大肠杆菌几个世代。预先标记的细胞或受照射或不受照射,然后用14C一溴尿嘧啶进行培养。掺入的14C放射性表现出与新复制的DNA部分有关。将细菌DNA进行氯化铯梯度离心时,3×109道尔顿的DNA分子被分成平均大小为6×106到1.6×107道尔顿的断片,根据浮力密度可分成三种类型的断片。一型是轻的DNA(1.710)由两条无溴尿嘧啶标记的链组成,另一型是混合DNA(1.754)由一条溴尿嘧啶标记的链和一条无溴尿嘧啶标记的链组成,第三型是重DNA(1.800)由两条溴尿嘧啶标记的链组成。

在未受照射的细菌中,14C放射性出现于混合峰的位置,并且在一个世代期间随着时间而增加。以后,在混合峰和重峰两者均可见到14C放射性。这反映了正常细菌的一种半保留线性的复制型。但是,受照射的细菌,在照射后前10分钟14C放射性首先出现于轻峰和混合峰之间的中间区域(即有限的复制)。到20分钟时和以后,14C在混合峰中大量地出现,同时也开始在重峰中出现(即重复复制),比未受照射细胞在重峰中出现早得多。即使重峰形成时,在照射细菌中仍保留一个轻峰 。

受照射细菌的复制型可解释如下。照后即刻短时间内,细菌能使已开始复制的DNA继续进行复制,但不能开始新的复制。将细菌放到缺乏氨基酸的培养基或氯霉素中,可观察到相似的中间峰,这一情况支持了上述设想。在此条件下,蛋白质合成受抑制,而只有已经复制的DNA能继续复制。这与由一个无溴尿嘧啶的链和一个部分有溴尿嘧啶标记及部分无溴尿嘧啶标记混合的链组成的DNA的中间密度也是一致的。此类型的复制称为“有限的复制”。但是,20分钟以后细菌仍可再开始复制。由于蛋白质合成受抑制,可影响DNA合成的开始复制,故新蛋白质的合成,如复制点的蛋白质合成,对DNA复制的开始非常重要。推想DNA复制的启动或生长点是受染色体其它位点的远距离控制。在已复制的DNA部分(混合部分)中已形成复制点时,从这些点复制的一些DNA可包含两条溴尿嘧啶标记的链或重DNA。这称为“重复复制”。在照射时复制点的区域也观察到重复复制。这种障碍可使DNA的某个部分的复制受抑制或延迟,因而造成照射细菌中持续存在一个轻峰  。