发布时间:2019-04-04 10:41 原文链接: 体细胞融合实验——悬浮培养细胞的融合

实验材料

细胞

试剂、试剂盒

PEG1000

仪器、耗材

离心管

实验步骤

1. 从无血清培养基中沉淀杂交前体细胞。

2. 倒尽上清。

3. 用手指弹拨管底或双手搓转离心管,使细胞重新悬浮。

4. 加入 1 ml PEG1000,待 2 分钟。

5. 加入 5 ml 含 10% FBS 的培养基稀释 PEG。于室温,200 g 离心 5 分钟沉淀细胞。

6. 加 5 ml 含 10% FBS 的培养基,轻轻转动离心管重悬细胞,尽量不要打碎细胞,按步骤 5 重新沉淀细胞。

7. 最后一次以适量生长培养基重悬细胞,24~48 小时后加入选择培养基。

8. 筛选细胞:融合 12~24 小时后就可以进行异核体分析。

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