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体细胞融合实验——悬浮培养细胞的融合

实验材料细胞试剂、试剂盒PEG1000仪器、耗材离心管实验步骤1. 从无血清培养基中沉淀杂交前体细胞。2. 倒尽上清。3. 用手指弹拨管底或双手搓转离心管,使细胞重新悬浮。4. 加入 1 ml PEG1000,待 2 分钟。5. 加入 5 ml 含 10% FBS 的培养基稀释 PEG。于室温,200 g 离心 5 分钟沉淀细胞。6. 加 5 ml 含 10% FBS 的培养基,轻轻转动离心管重悬细胞,尽量不要打碎细胞,按步骤 5 重新沉淀细胞。7. 最后一次以适量生长培养基重悬细胞,24~48 小时后加入选择培养基。8. 筛选细胞:融合 12~24 小时后就可以进行异核体分析。展开......阅读全文

植物原生质体融合的原理及进展

  摘要  本文对植物的原生质体融合技术得研究进展进行了综述。阐述原生质体制备、培养方面的研究进展,随后介绍了原生质体融合方法、融合机理和融合方式等的研究进展,最后对其今后的应用前景进行了展望,为原生质体融合技术的发展提供了参考。  关键词  原生质体 融合技术 研究进展  01  —  原生质体制

植物原生质体融合技术的研究进展

  01  —  原生质体制备  1.材料的选择及预处理  许多研究表明,在原生质体分离之前,先对植物材料进行预处理能够有效提高原生质体的游离效率,在同等材料用量下可以分离出较多的原生质体。柳玉晶等[1]的研究表明,在分离百合叶片原生质体前对其进行13%甘露醇预处理和黑暗处理能显著提高原生质体产量。

小鼠胚胎干细胞的培养

实验概要了解小鼠胚胎干细胞的培养方法。主要试剂1. 贮存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺(200mM) MEM NEAA(10mM) HEPES(1M) β-巯基乙醇(55Mm) 转铁蛋白50mg/ml 胰岛素5mg/ml 亚硒酸钠300μM 黄体酮(20μM) 腐

光学磁扭仪和荧光诱导活细胞细胞核蛋白的分解

实验概要机械力在生物过程中发挥着显著作用。这些机械力可以通过骨架长丝网络传送到细胞,诱导胞浆内不同的生化反应。虽然已经有充足的报告显示,细胞质酶可被细胞表面的局部应力直接激活,但一直没有证据表明,机械力可以直接改变核功能,包括卡哈尔体蛋白质复合物的结构变化。本实验描述了通过利用磁场扭曲力改变,流式细

胞内晶体蛋白基因的酿酒酵母真核表达

实验概要本实验将酿酒酵母作为胞内晶体蛋白的携带和表达宿主,同时,作为可能的营养体喂养海洋线虫P. redivivus将所表达的目的蛋白导入线虫机体,观察线虫的生长、发育、繁殖或是死亡情况,探讨胞内晶体蛋白对昆虫病原线虫以外的线虫是否具有营养作用。为此,首先构建一种重组大肠杆菌,其所携带的重组质粒能够