比色效果的表达以往通用光密度(oplical density,OD),现按规则用吸光度(absorbence,A),两者含义相同。通常的标明方法是,将吸收波长写于A字母的右下角,如OPD的吸收波长为492nm,标明方法为"A492nm"或"OD492nm"。
酶标比色仪简称酶标仪,通常指专用于测读ELISA试剂盒效果吸光度的光度计。关于固相载体方法的不相同,各有特制的适用于板、珠和小试管的规划。许多试剂公司配套供应酶标仪。酶标仪的主要功用目标有:测读速度、读数的性、重复性、度和可测规划、线性等等。优异的酶标仪的读数通常可到0.001,性为±1%,重复性达0.5%。举例说,若某孔测得的A值为1.083,则该孔相关于空气的真实A值应为1.083±0.01(1.073~1.093),重复测定数次,其A值均应1.083±0.05(1.078~1.088)在之间。酶标仪的可测规划视各酶标仪的功用而不相同。通常的酶标仪在0.000~2.000,新类型的酶标仪上限拓宽达2.900,甚至更高。超出可测上限的A值常以"*"或"over"或其它符号标明。应留心可测规划与线性规划的不相同,线性规划常小于可测规划,比如某一酶标仪的可测规划为0.000~2.900,而其线性规划仅0.000~2.000,这在定量ELISA中制造标准曲线时应予留心。
酶标仪不该安排在阳光或强光照射下,操作时室温宜在15~30℃,运用前先预热仪器15-30分钟,测读效果更安稳。
ELISA试剂盒测读A值时,要选用商品的活络吸收峰,如OPD用492nm波长。有的酶标仪可用双波长式测读,即每孔先后测读两次,在最适波长(W1),第2次在不活络波长(W2),两次测定间不移动ELISA试剂盒板的方位。例如OPD用492nm为W1,630nm为W2,毕竟测得的A值为两者之差(W1-W2)。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等形成的光烦扰。
肉眼判断结果时,显色浅不易观察,影响结果的准确性,必须使用酶标仪检测,以保结果一致性。
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