光学显微镜的石蜡切片制作过程

    I.将组织块放入带标记的盒子内，光学显微镜置于200m1液体中;

    2.按选定的温度加热;测定温度。

    3.光学显微镜3%戊二醛预固定15秒钟;缓冲液冲洗3次，光学显微镜每次3分钟;1 %OsO;固定15秒钟。如中断操作，预固定后仍需在4℃下保存.

    用微波脱水、浸透每一步骤只需1-3分钟;包埋需30-60分钟。每次从微波沪中取出之后，在室温中静置1-2分钟，以保证试剂液体渗入标本，光学显微镜与组织充分作用.

   重包埋

    1.电镜环氧树脂包埋标本极少数情况下需重新包埋。如若需重包埋，具体操作如下:

    Epon块放置无水乙醉+KOH中浸泡数小时，可过夜，液体呈深棕色。组织块用无水乙醇洗后，置于氧化丙烯中浸泡，然后用Epon重包埋。

    Spur:树脂包埋块需用氧化丙烯浸泡并加超声处理以除去树月旨.

    2.光学显微镜石蜡包埋组织块或厚切片可重包埋用于超徽结构研究.具体做法是用100写二甲苯去石蜡，振荡1小时;经乙醉由I00%-95%~75%~50%，每次15分钟;光学显微镜于缓冲液中过夜.将组织块切成1mm3，用Os0,固定按电镜标本制作过程进行。

    石蜡厚切片可裱在玻片上，置于一广口瓶内，加100%二甲苯脱蜡;经丙酮由100%一95%-'75%--'50%;退至缓冲液。再以oso;固定、丙酮脱水、Epon浸透、包埋。浸透与包埋的做法是.用丙酮与Epon (1:1)混合液1-2滴加在切片上，光学显微镜20分钟后加1滴纯Epon包埋液。将充满包埋液的胶囊倒扣在玻片的厚切片上，60 *C聚合.后用液氮或干冰浸泡分离玻片。

    用电子显微镜，人们可以观察细胞的微细结构。光学显微镜但观察的切片必须很薄(50- 100nm ).要将生物样品切成厚为几十纳米(nm)、而又没有刀痕与颤痕的薄片。