免疫疗法中的液态活检

如今人们知道T细胞能够识别并杀死肿瘤细胞，利用抗肿瘤活性为目的的治疗方法被称为癌症免疫疗法。可通过使用克隆特异性T细胞受体（TCR）来扫描出现在组织相容性复合体（MHC）上的小肽片段，从而实现T细胞检测异常肿瘤细胞。

许多人类肿瘤存在大量的DNA突变，过去研究证明了突变基因编码的“肿瘤抗原”是当前癌症免疫疗法发展的一个主要推动力。由于新抗原的表达完全受限于肿瘤，发展增强肿瘤抗原特异性T细胞反应的疗法最为受欢迎。然而，由于肿瘤患者（如黑色素瘤患者和肺癌患者）中的绝大多数突变在预见频率上不具共享性，这导致事实变得更加复杂，因此肿瘤对免疫系统出现排异大部分归因为私有抗原。如何开发新抗原特异自体T细胞产品？科学家需要新鲜的肿瘤材料，然而这种壮举难以在多种肿瘤中实现。

Nature子刊：免疫疗法中的液态活检

图注：在新研究中，研究人员表明在个体癌症患者的血液中发现同样的T细胞PD-1表达。通过这种方法，循环CD8+T细胞表达的PD-1不仅为肿瘤中T细胞抗肿瘤活性打开了窗口，还可作为肿瘤免疫疗法中分离肿瘤反应CD8+T细胞的标志物。绿色细胞代表表达PD-1（对肿瘤细胞突变抗原做应答）的肿瘤抗原特异性CD8+T细胞，蓝细胞代表表达特异性抗原而非肿瘤抗原的CD8+T细胞。

近日，发表于《Nature Medicine》上的研究展现了一种获取肿瘤抗原特异性T细胞的捷径，研究人员表示可以从黑色素瘤患者的循环血液中将其准确分离。这样一来，他们为具有广阔应用潜力的癌症自体免疫细胞治疗新思路打下了基础。

在本次研究中，研究人员用以确定外周血肿瘤反应T细胞群的方法聚焦于毒性CD8+ T细胞群。早前该研究团队曾表明黑色素瘤患者中对肿瘤侵润性T细胞反应的肿瘤富含表达PD-1的T细胞。为了测试外周血T细胞是否也有这样的效应，研究人员使用流式细胞仪分离癌症患者血液中表达或不表达PD-1的CD8+T细胞群，同时研究人员通过深度测序以确定相应患者的肿瘤特异性基因突变，将突变的基因片段在自体树突状细胞中进行人为表达。

通过对抗原呈递细胞和从患者血液中分离出来的不同CD8+T细胞群进行共培养，研究人员发现血液中T细胞PD-1的表达（PD-1–expressing T cells），而不是（或很少）缺乏PD-1的T细胞对个体肿瘤中的抗原具有反应性。有趣的是，作者还表明血细胞室中表达PD-1的T细胞的肿瘤抗原特异性与肿瘤本身PD-1表达T细胞非常相似。

本次研究共有四个黑色素瘤患者参与，研究人员从三个患者的血液中分离出突变特异的T细胞，该结果如何应用至黑色素瘤的一般人群还有待观察，因此更不用说用于其他类型的癌症。然而，通过展示PD-1+T细胞子集中的肿瘤反应，该研究引发了很多值得深思的问题。

首先，如何将这些观察转化到T淋巴细胞子集中：CD4+帮助T细胞？这种T细胞亚型有助于启动或保持T细胞应答的持久性，包括针对肿瘤的T细胞。此外，与CD8+对应，CD4+辅助T细胞可识别伴随DNA突变而出现的肿瘤抗原，也曾有病例报告表明了这些细胞的潜在临床效用性。因此，了解能否使用PD-1或其他的标记物来识别血液腔中的肿瘤特异CD4+ T细胞显得非常重要。

其次，作者观察到了血液腔中肿瘤特异性CD8+T细胞在其他标记物或抗体缺乏时表达PD-1，那么问题来了，在这种情况下是什么使PD-1特殊？可以想象，循环T细胞PD-1的表达揭示了这些细胞曾经遇到的一些激活信号，这也是将来的研究热点。