免疫荧光的标本制作的基本程序和DAB显色的组化类似:
1 免疫荧光不需要使用双氧水处理,封闭和一抗孵育与其它相同
2 免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育,孵育时间根据抗体的工作浓度确定
3 二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察
4、免疫荧光在封片使用专用封片剂(如果你经费比较充足)或甘油:0.01MPBS (7:3)
5 封片后的标本4度冰箱保存,照像后可以在-70度的冰箱保存备用
6 条件许可可以购买防淬灭的试剂加入封片剂中,标本可以保存更久
7 荧光抗体的孵育以及后续处理需要闭光
8 荧光抗体染色假阳性可能会多,需要设定阳性和阴性对照
化学发光是利用化学反应产生的能量促使产生能级跃迁,从而发光,典型的如鲁米诺检测血迹;荧光是一种光致发光现象,必须提供光源去激发分子产生能级跃迁,进而发光。使用上述两种方法进行免疫分析时,其区别很明显,......
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2016年8月19日,国际著名遗传学杂志《美国人类遗传学杂志》(TheAmericanJournalofHumanGenetics)在线发表了复旦大学生命科学学院,遗传工程国家重点实验室及遗传与发育协......
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