用于免疫荧光染色的染料需具备以下几个条件:
荧光染料应有较高的量子产额和消光系数;
荧光染料对488nm的激发光波长有较强的吸收;
发射光波长与激发光波长之间应有较大的波长差;
容易与被标记的单克隆抗体结合而不影响抗体自身的特异性。
1.异硫氰酸荧光素(FITC):可产生亮绿色荧光。FITC是免疫荧光标记最常用的荧光探针。
2.德州红:与生物素偶联的抗体有很强的亲和力,产生红色荧光。
3.藻胆蛋白类:主要包括藻红蛋白(PE)、藻青蛋白(PC)、别藻青蛋白(APC)三类。多发生橙色至红色荧光。
4.能量传递复合染料
化学发光是利用化学反应产生的能量促使产生能级跃迁,从而发光,典型的如鲁米诺检测血迹;荧光是一种光致发光现象,必须提供光源去激发分子产生能级跃迁,进而发光。使用上述两种方法进行免疫分析时,其区别很明显,......
血液系统中的成体干细胞,是一个异质性的群体,具有长期自我更新的能力和分化成各类成熟血细胞的潜能。它是研究历史最长且最为深入的一类成体干细胞。但是,你真的知道它的最初起源吗?弗吉尼亚大学医学院的肾脏研究......
2016年8月19日,国际著名遗传学杂志《美国人类遗传学杂志》(TheAmericanJournalofHumanGenetics)在线发表了复旦大学生命科学学院,遗传工程国家重点实验室及遗传与发育协......
组织切片免疫荧光实验步骤徐索文1.切片自然晾干2.复水5-10min3.PBS5min3次4.4%PFA4度固定30分钟或者冷丙酮4度固定10分钟5.PBS5min3次6.滤纸吸干,用免疫组化笔在切片......