全二维液相色谱法分析葛根汤颗粒中的有效成分

全二维(Comprehensive 2D-LC)液相色谱技术是复杂样品分离的理想方案。使用双流路/双阀交替切换设计，将第一维的流出的组分连续转移到第二个色谱柱 (第二维) 继续分离，如此两个独立的分离模式正交组合可实现尽可能高的峰容量，特别适合于分析天然产物、中药、药物杂质、食品提取物、合成聚合物等。

在一维中不能分离的化合物，可以在二维中分离，从而发现因共流出而隐藏的峰

葛根汤（中医方剂）具有促进发汗的作用以及消炎镇痛效果，对感冒、头痛、肩周炎等症状有缓解作用。由葛根、麻黄、甘草、芍药等多种中药材组成，主要成分包含的麻黄碱、甘草酸和肉桂酸对抑制各种感冒症状非常有效。在质量管理过程中，需要同时识别药物中存在的多种有效成分，对复杂样品进行高分离度分离，使用全二维液相色谱仪 Nexera-e 是一种非常有效的手段。

Nexera-e全二维液相色谱仪（PDA检测器）

与许多传统中药一样，葛根汤含有许多极性较大的化合物，所以pH值是实现分离最佳化的重要参数。本示例中，基于采用半微量反相柱和中性pH流动相进行一维分离，采用超高速反相柱和酸性pH流动相进行二维分离。此外，还对三种不同厂家的商品化葛根汤颗粒进行了比较，并测定了有效成分甘草酸的含量。

1分析条件

2自动梯度功能

通常LC x LC（反相x反相）的分析过程中，随着定量环转移来的1D有机溶剂浓度的增加，2D的分离和峰形可能会因溶剂效应而恶化，造成分离不良。而Nexera-e的“自动梯度功能”能够很好地解决这个问题，它可根据1D的梯度程序和调制时间自动调整2D的梯度洗脱程序，创建复杂的LC x LC梯度条件就像常规LC的参数设置一样简单。

梯度时间程序，1D（蓝色），2D（粉色）

3标准溶液测试

以甘草酸为标准溶液进行了测试，建立了校正曲线，并进行了重复性考察（n=6）。具有优异的线性和重复性。下图为甘草酸标准溶液的二维等高线图，横轴显示一维保留时间，纵轴显示二维保留时间。

甘草酸标准溶液的全二维等高线图(50mg/L)

4不同样品对比

对三种商品化的葛根汤颗粒进行了分析，上图为它们的二维等高线图。因为提供了足够高的分离度，从二维等高线图中可以很清楚地观察到不同样品间的差异。另外，实验成功地测定了颗粒中有效成分甘草酸的含量，样品C所含的甘草酸含量最高。

5总结

1 Nexera-e全二维液相色谱仪提供足够高的分离，可实现对样品更深入全面的理解，是复杂样品分离的理想方案。

2 通过Nexera-e的自动梯度功能，第二维的梯度设置根据调制时间自动生成，可轻松设置第二维程序。

3 Nexera-e 系统提供高耐压高稳定高精确的输液和2D切换，分析结果具有优异的重复性和可靠性。