首先行穿刺区域常规消毒后铺无菌巾，并行穿刺局部浸润麻醉。（注意麻醉时，不要刺伤肺组织）。肺穿刺活检可分为细针穿刺细胞学检查及切割针穿刺组织学检查。
1.细针穿刺细胞学检查 先将穿刺针刺入皮肤后沿术前影像学所定的穿刺部位、方向及深度，缓慢进针（能在超声引导下穿刺最为理想），直至进入预定穿刺目标后，拔去针芯，接上20毫升注射器，在保持负压状态下使针尖在病灶内作小幅度上、下提插2～3次，然后去掉负压并拔针。迅速将抽吸物推置于玻片上，涂片后即用95%酒精固定送细胞室检查。
2.多孔倒钩针穿刺组织学检查 首先用手术刀在穿刺点表面皮肤上作一小口，以利进针。将穿刺针从肋间沿原定的穿刺方向及深度直插到肿瘤底部后，抽出针芯并将针在肿瘤内往返提插数次，使更多的组织陷入针孔（操作中应保持垂直进针与出针，不得摆动），然后拔针。用针芯推出瘤组织于消毒的滤纸片上，固定，送检。
3.槽式针穿刺组织学检查 用带针芯的槽式穿刺针活检时，它不同于多孔倒钩针的方法是当穿刺进入肿瘤包膜后，抽出针芯继续前进，肿瘤组织可沿针槽嵌入针腔内，此时应旋转180°～360°割断瘤组织，并迅速出针。用针芯推出组织块于消毒滤纸片上，固定、送检。
