冷冻电镜成像

冷冻的样品冷冻输送器转移到电镜的样品室，在电镜成像之前，需确认样品中的水处于玻璃态。由于生物样品对高能电子的辐射敏感，成像时必须使用低剂量技术（<20e/ Å2）。低剂量技术要点：

• 寻找观察区域要在低倍下进行（1-3K）；

• 聚焦在拍照区域的相邻区域进行（100-300K）；

• 记录区域仅在拍照时受到辐射（30-60K）；

Titan Krios系统整体结构（左）和内部结构（右）

经过透射电子显微镜中一系列复杂的过程，最终在记录介质上会形成样品放大几千倍至几十万倍的图像。近年来，基于互补金属氧化物半导体（CMOS）技术开发的直接探测电子成像的装置使电子显微放大图像的信噪比相对过去所使用的底片或电荷耦合元件（CCD）有了很大提高，进而提高了成像的质量。