凋亡蛋白质的原核表达与纯化

摘要：目的构建来自鸡贫血病毒（CAV，chicken anaemia virus）VP3 基因编码的凋亡蛋白质表达载体，在大肠杆菌中进行表达，并研究凋亡蛋白质的纯化和稳定性。方法PCR（polymerase chain reaction）获得正确编码VP3 基因片断，构建表达质粒pET-28a-VP3 在E. coli BL21(DE3)中表达。用Ni-NTA 柱纯化可溶性目标蛋白质，并研究不同条件下凋亡蛋白质的稳定性。结果目标蛋白质在大肠杆菌中获得表达，纯化后蛋白质纯度高于90 %，卡拉胶可明显提高重组蛋白质可溶状态下的稳定性。结论成功获得高纯度VP3 可溶性蛋白质，增加了目标产物的稳定性，为进一步研究该蛋白质的临床应用奠定基础。