凝血酶的效价测定

　　纤维蛋白原溶液的制备

　　取纤维蛋白原约30mg，精密称定，用0.9% 氯化钠溶液1.5ml溶解，加凝血酶0.1ml(约3单位)，快速摇匀,室温放置约1小时至完全凝固，取出凝固物，用水洗至洗出液加硝酸银试液不产生浑浊，在105℃干燥3小时,称取重量,计算纤维蛋白原中含凝固物的含量(%)。然后用0.9%氯化钠溶液制成含0.2%凝固物的纤维蛋白原溶液,用0.05mol/L磷酸氢二钠溶液或0.05mol/L磷酸二氢钠溶液调节pH值至7.0～7.4，再用0.9%氯化钠溶液稀释成含0.1%凝固物的溶液，备用。

　　标准曲线的制备

　　取凝血酶标准品，用0.9%氯化钠溶液分别制成每1ml中含5.0单位、6.4单位、8.0单位、10.0单位的标准品溶液。另取内径1cm、长10cm的试管4支,各精密加入纤维蛋白原溶液0.9ml，置37℃±0.5℃水浴中保温5分钟，再分别精密量取上述4种浓度的标准品溶液各0.1ml，迅速加入上述各试管中，立即计时、摇匀，置37℃±0.5℃水浴中，观察纤维蛋白的初凝时间，每种浓度测5次,求平均值（5次测定之最大值与最小值的差不得超过平均值的10%,否则重测）。标准品溶液的浓度应控制凝结时间在14～60秒为宜。在双对数坐标纸上，以每管中标准品实际效价（单位）为横坐标，凝结时间（秒） 为纵坐标，绘制标准曲线。

　　测定法

　　取本品3瓶，分别精密称定其内容物的重量,每瓶按标示量分别加0.9%氯化钠溶液制成与标准曲线浓度相当的溶液，精密吸取0.1ml，按标准曲线的制备方法平行测定5次，求出凝结时间的平均值（误差要求同标准曲线），在标准曲线上或用直线回归方程求得效价（单位），

　　式中U为0.1ml供试品在标准曲线上读得的实际效价(单位)；

　　V为每瓶供试品溶解后的体积，

　　10为0.1ml换算成1.0ml的数值；

　　W为每瓶供试品的重量，mg。

　　并计算出每瓶相当于标示量的百分数。

　　每瓶效价均应符合规定，如有一瓶不符合规定，另取3瓶复试，均应符合规定。