凝集素(lectin)是一种无免疫原性糖蛋白,与糖的结合有一定专一性,如伴刀豆凝集素只与葡萄糖、甘露糖结合,麦胚凝集素只与 N-乙酰葡萄糖结合。并且,凝集素还可与标记物结合,如胶体金、辣根过氧化物酶等,因此可将作为检测糖基的一种简单而具有选择性的探针。不过由于糖类的复杂性以及凝集素特异的相对性,凝集素显示糖类细胞化学结果相对比较粗糙。细胞成熟过程中、肿瘤细胞或细胞发生损伤等情况下,凝集素分布情况都可发生改变。
| 实验材料 | |
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| 试剂、试剂盒 | |
| 实验步骤 | 1. 制备或购买凝集素-胶体金探针。 2. 组织常规固定,游离细胞打散,组织切片切薄。 3. 漂洗 3 次。 4. 5~25 μg/ml 凝集素-胶体金 15~25℃ 孵育 30~60 min。 5. 漂洗、锇酸固定同常规 |
| 注意事项 | 1. 凝集素与糖的结合属于亲和细胞化学,因此可参照免疫细胞化学方法。 2. 如果凝集素为生物素化的凝集素,可以用 ABC 或亲和素金标记显示。 |