发布时间:2019-04-07 14:49 原文链接: 凝集素显示糖类细胞化学实验

凝集素(lectin)是一种无免疫原性糖蛋白,与糖的结合有一定专一性,如伴刀豆凝集素只与葡萄糖、甘露糖结合,麦胚凝集素只与 N-乙酰葡萄糖结合。并且,凝集素还可与标记物结合,如胶体金、辣根过氧化物酶等,因此可将作为检测糖基的一种简单而具有选择性的探针。不过由于糖类的复杂性以及凝集素特异的相对性,凝集素显示糖类细胞化学结果相对比较粗糙。细胞成熟过程中、肿瘤细胞或细胞发生损伤等情况下,凝集素分布情况都可发生改变。

实验材料

组织样品

试剂、试剂盒

凝集素-胶体金探针锇酸

实验步骤


1. 制备或购买凝集素-胶体金探针。


2. 组织常规固定,游离细胞打散,组织切片切薄。


3. 漂洗 3 次。


4. 5~25 μg/ml 凝集素-胶体金 15~25℃ 孵育 30~60 min。


5. 漂洗、锇酸固定同常规

注意事项

1. 凝集素与糖的结合属于亲和细胞化学,因此可参照免疫细胞化学方法。


2. 如果凝集素为生物素化的凝集素,可以用 ABC 或亲和素金标记显示。