几种常用特殊PCR技术

几种常用特殊PCR技术

（一）逆转录PCR（Reverse transcription－PCR,RT-PCR）

RNA经逆转录后可作为PCR的模板.逆转录PCR（RT－PCR）常用于基因表达研究（定量PCR）和逆病毒检测．

设计RT－PCR引物时，应使引物分别位于不同的外显子中，以便区别cDNA和gDNA扩增产物。

（二）多重PCR（Multiple PCR）

在同一PCR反应体系中用多对引物（覆盖不同长度的靶序列）同时扩增。

例如用多重PCR进行DNA缺失筛选

(三) 套式PCR（nested PCR）

用第一次PCR扩增区域内部的第二对（套式）引物对第一次PCR产物再次扩增,可以增加特异性和灵敏度。

(四)非对称PCR（asymmetric PCR）

在PCR反应体系中，限制引物之一的浓度（50－100:1）进行扩增，可得到单链PCR产物,可用于制备单链测序模板或单链DNA杂交探针。