利用Marligen总RNA快速纯化系统纯化总RNA实验

乙醇 β-巯基乙醇

转子-定子均化器或类似设备 Marligen Rapid Total RNA System

一、材料

1.缓冲液、溶液和试剂

乙醇,70%和100%

β-巯基乙醇

2.特殊设备

转子-定子均化器或类似设备

3.其他

Marligen Rapid Total RNA System(Marligen Biosciences)

二、方法

(1）加β-巯基乙醇制备裂解溶液。

(2）按照厂商的方案要求，向细胞和组织样品中加裂解溶液（裂解液体积取决于所处理样品的大小）。用转子-定子均化器或类似设备均化。

(3）向裂解产物中加等体积的70%乙醇。均质化裂解产物以使沉淀分散。

(4）将裂解产物置随试剂盒提供的离心套柱中，在微量离心机中12000~16000g离心。

(5）用700ul洗涤缓冲液1洗涤一次，12000~16000g离心1min。

(6）用洗涤缓冲液2洗涤两次，每次500ul,12000~16000g离心1min。

(7）12000~16000g离心2min以移弃残留洗涤缓冲液。

(8）参照试剂盒的使用说明用适董的水从柱中洗脱RNA。然后储存于-70°C。较少的样品可用45ul水洗脱，样品较多可用20ul水洗脱。