利用SCICPMS法测定单个细菌细胞中的铁含量

优势：

ICP-MS 法可以分析成批培养的细菌细胞中的总金属含量，然后根据测得的细胞总数平均算出单个细菌细胞的铁含量。由于平板计数法无法计算死亡细胞或未被培养的完整细胞，导致计数出现误差。然而，由于仪器的限制，目前还未见有方法可直接分析单个细菌细胞中的铁含量。基于单细胞ICP-MS (SC-ICP-MS) 分析技术取得的重大进展，使得直接测定单个细胞内金属含量成为现实。PerkinElmer 公司的Asperon™单细胞雾室将单个完整细胞引入ICP-MS的等离子体中，结合NexION® 系列ICP-MS 质谱仪瞬时采集速度快的优势，可确定单个细菌细胞内的铁含量。在本次实验中，我们利用SC-ICP-MS 法分别测定了三种菌株的单个细胞的铁含量。这三个菌株分别是大肠杆菌B 株(Eco)、枯草芽孢杆菌168 株(BAC) 和红球菌RHA1 株(RHA)。SC-ICP-MS 技术可直接测定单个细胞的铁含量，并确定每种菌株的铁含量分布情况。铁含量与细菌的细胞大小相关，即大菌株(RHA)单个细胞的平均铁含量高，而小菌株(Eco) 单个细胞的平均铁含量低。

对于SC-ICP-MS 分析，大肠杆菌B 株、枯草芽孢杆菌168 株和红球菌RHA1 株均生长至具有相同的光密度，并离心至一个细菌细胞聚合体上。然后，立即将样品冷冻、冷冻干燥并混匀。称取制备好的样品(10 - 30 mg) 放入Savillex® PFA 中。加入Optima® 级浓硝酸在电热板上进行密闭消解。消解后将样品加热至近干，复溶于5 mL 的0.05 M HNO3 中。加拿大国家研究院的NRCC 龙虾肝胰脏(TORT-1) 作为标准参考物质。使用纯氨气的反应模式分析56Fe。