动物食品中*地**泮|安**酮的检测

目标
建立高效的气相色谱质谱检测方法，灵敏、快速测定动物性食品中的地**泮|安**酮的含量。样品中的目标物经乙腈提取，固相萃取小柱净化后用气质
联用仪分析。引言 
地**泮|安**酮在临床上作为镇
静催眠药，属于精神管制药,长期服用有成瘾性和依赖性。
近年来 , 随着畜牧养殖业的发展 , 有不法分子在经济利益
的驱动下,擅自在畜禽饲养中添加使用以期增加产肉量。
地**泮|安**酮在饲料中的滥用 , 将zui终导致畜产品中
药物的残留 , 从而严重影响消费者的身体健康 [1]。
地**泮|安**酮的测定方法多集中在临床制药和刑侦检
测方面 , 如血液、尿液、胃内容物等。主要有紫外分光
光度法检测 ; 液液提取 , 用 HPLC 分析 ; 固相萃取 ,GC-FID
或 GC-MS 测定 ; 用薄层层析分离定性 , 用薄层扫描测定含
量 [1 ～ 3]
。
本方法是将样品中的地**泮|安**酮用乙腈提取，固相
萃取的方法净化后用气相色谱 - 质谱进行定性、定量。
该方法定量准确，灵敏度高，重现性好，能够满足目前
动物性食品中地**泮|安**酮检测的需要。
仪器
Trace1310-ISQ 气相色谱质谱联用仪，配 EI 源（Thermo 
Scientific）；AS1310 自动进样器（Thermo Scientific）
恒温水浴锅、离心机、天平、漩涡混合器、氮吹仪、固
相萃取仪（Thermo Scientific）

耗材
色谱柱：TG-5SilMS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）（Thermo Scientific, 
PN: 26096-1421）
C18 SPE 柱，500 mg，3mL（Thermo Scientific）
试剂与标准品
地**泮|安**酮标准储备溶液：浓度 200 μg/ml；
正己烷、乙腈、甲醇：色谱纯 (Thermofisher)
标准溶液的制备
精密移取适量地**泮|安**酮标准储备液，根据需要将
标准储备液用甲醇稀释到使用浓度 10 μg/ml。然后再精密
量取 10 μg/ml 的混合标准工作液适量，用甲醇稀释，配
制成浓度为 0.5、1、5、10、50、100、500 和 1000 ng/ml 的
系列标准工作液，待测。
样品前处理
提取
取适量新鲜的猪肉样品，用匀浆机绞碎，并使均质。取均质后的供试样品，作为供试材料，空白样品作为空白
试料；均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，
作为加标回收材料。
称取试料约1.0 g(精确到0.01 g)，于15 ml离心管中，加入
10 ml乙腈，涡旋后水浴超声5 min，8000 r/min离心10 min，
取上清液于50 ml离心管中，加入30 ml正己烷，涡旋混匀
后静置，弃上层液。取下层液，于50 ℃氮气吹至1 ml，加
水 4 ml，混匀备用。
净化
C18 柱依次用甲醇 5 mL 和水 5 mL 活化，取备用液过柱，
用 50% 甲醇水溶液 5 mL 淋洗，用 70% 甲醇水溶液 5 mL
洗脱，收集洗脱液，于50℃氮气吹干，用200 μl甲醇复溶，
待测。
实验条件
色谱柱：TG-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；
柱温：150℃（1 min），10℃/min到290℃（4 min）；
进样模式：不分流进样；进样量：1 µL，分流时间 1 min；
进样口温度： 290℃（15 min）；载气：氦气（99.999%），恒流模式，1 mL/min；
质谱离子源温度：310℃，传输线温度：290℃；
扫描模式：选择离子监测模式，每个离子驻留时间0.09 s，
地**泮：283,256*,241,221；安**酮：250, 235*, 217,91；
结果与讨论
仪器分析方法优化：以全扫描的方式对目标物标液进行
测定，得到其质谱图，根据全扫描质谱图经 NIST 谱库检
索进一步确证目标化合物，得到其保留时间，选择合适
的定性和定量的特征目标监测离子。测定时，可根据标
准物和待测物的定量离子图中的峰面积，外标法定量。
确证时，可根据碎片离子及其丰度比作为其阳性判别的
依据。在选定的色谱条件下，标准品的色谱图见图 1。
线性关系及测定低限：将 0.5、1、5、10、50、100、500
和 1000 ng/ml 的系列标准工作液由低浓度到高浓度进样。
以测定峰面积为纵坐标，对应的标准溶液浓度为横坐标，
绘制标准曲线如图 3，表 1.。分别将样品前处理项下的加
标回收样品，按照样品前处理步骤处理，所得的溶液进
样即得各组分的加标回收率，具体见表 2、表 3.。本实验
方法检出限以 3 倍信噪比计算得到，本方法测定猪肉中
地**泮|安**酮的的测定低限为 1.0 µg/kg。