化学发光免疫分析原理

化学发光免疫分析包含两个部分，即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化，形成一个激发态的中间体，当这种激发态中间体回到稳定的基态时，同时发射出光子(hM)，利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体)直接标记在抗原(化学发光免疫分析)或抗体(免疫化学发光分析)上，或酶作用于发光底物。
化学发光免疫分析根据其所采用的标记物的不同可分为发光物标记、酶标记和元素标记化学发光免疫分析三大类。发光物标记的CLIA是以发光物质代替放射性核素或酶作为标记物(如吖啶酯)，在反应体系中发光物质在碱性介质中氧化时释放大量自由能，产生激发态的中问体，该激发态的中间体由最低振动能级回到稳定的基态，各个振动能级产生辐射时，同时产生能量，多余的能量即为发射光子，从而产生发光现象。利用发光信号的测量仪器，分析接收的光量子产额，通过计算机系统转换成被测物质的浓度单位。在此系统中包含两个部分，化学发光反应系统和免疫反应系统，即在抗原一抗体特异性反应过程中，伴随有化学反应过程而产生光的发射现象。化学反应系统中以化学反应为基础，化学发光的首要条件是吸收了化学能而处于激发态的分子或原子必须能释放出光子或者能将能量转移到另一个物质的分子上并使这种分子激发，当这种分子回到基态时释放出光子。
化学发光与荧光的根本区别是形成激发态分子的激发能原理不同。荧光是发光物质吸收了激发光后使分子产生发射光；化学发光是化学反应过程中所产生的化学能使分子激发产生的发射光。因此，化学发光反应过程必须产生足够的激发能是产生发光效应的重要条件。化学发光反应可在气相、液相或固相反应体系中发生，以液相发光在免疫学检测中最常应用。