发布时间:2021-05-15 17:16 原文链接: 原代细胞冻存技术

1、选用生长情况好,数量较多的原代细胞,冻存前一天换液一次。

2、贴壁细胞需用0.25%胰酶常规消化将细胞消化下来,将细胞悬液收集至离心管中。

3、1000rpm离心5分钟,弃上清液。

4、沉淀加含DMSO的培养液,计数,调整至(1-10)×106 /ml。

5、将悬液分至冻存管中,每管1 ml。

6、密封冻存管,封口一定要严,否则复苏时易出现爆裂。

7、用记号笔标明细胞种类,冻存日期。

8、按下列顺序降温:室温→4℃(20分钟〕→冰箱冷冻室(30分钟)→超低温冰箱(-80℃过夜)→液氮。


相关文章

原代细胞计数的操作步骤

一、原代细胞计数 将血球计数板及盖片用擦试干净,并将盖片盖在计数板上。 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间。 静置3分钟。 镜下观察......

新方法实现鸭胚肝脏原代细胞快速分离和培养

近日,中国农业科学院饲料研究所科研人员研究创新了一种简单、快速的鸭胚肝脏原代细胞分离和培养方法,并研究了鸭胚肝脏原代细胞胆碱缺乏模型中的基因可变剪切,为鸭胆碱与基因结构的相关性研究提出了新的见解。相关......

卵子冻存是癌症患者保存生育能力的宝贵选择

根据纽约大学朗格尼医学中心研究人员的研究报告,对于女性癌症患者而言,如果想在化疗前保存生育能力,卵子冻存是一个非常好的选择。对于夫妇而言,胚胎冷冻仍然是首选方法,而对于年轻患者,冷冻卵子或胚胎均有40......

医学界探索冻存卵巢 保护女性生殖能力

卵巢是女性重要的内分泌和生殖器官,对女性具有重要意义,一旦受损或功能丧失,将严重影响女性的生理功能。近几十年,随着癌症治疗技术的进步,年轻癌症患者的生存率有了很大提高。然而,用于治疗癌症的放化疗技术常......

原代细胞传代技术

一、贴壁细胞的消化法传代1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或与EDTA混合液)轻轻摇动培养瓶,使瓶底细胞都浸入溶液中。3、消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察,发......

原代细胞分离技术

取人或动物体内(或胚胎)的组织,将其剪碎至1mm3的组织块,再采用的如下方法进行分离培养:一、悬浮细胞的分离方法1、将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。2、......