原代细胞培养后过氧化物酶检测

试剂和器材： 
1. 过氧化物储存液：30mmol/L过氧化氢储存在T-牛血清白蛋白（Tris-牛血清白蛋白溶液）中；
2. 样品缓冲液：2体积的T-牛血清白蛋白溶液+1体积的2%（体积分数）Triton X-100；
3. 钛氧硫化物（2.25g/L）溶于1mol/L硫酸中；
4. T-牛血清白蛋白：20mmol/L的Tris-HCl（pH7.0），含1g/L牛血清白蛋白；
5. 微量离心机，带2.0ml微量离心管；
6. 分光光度计；

实验方法：
原代细胞培养后，所有操作都在2ml微量离心管中，置于冰上进行，所有溶液也保持在冰浴环境下。
1. 新鲜制备待测混合物，将8.5ml过氧化物储存液用T-牛血清白蛋白溶液稀释至100ml；
2. 向0.5ml测定混合物中加入1.0ml钛氧硫化物，在405nm波长下测定吸光度，应该约为1.5.如果不是，就相应地调整过氧化氢的浓度；
3. 将10μl样品与30μl样品缓冲液相混合，反应对照液使用40μl样品缓冲液；
4. 所有管子中都加入0.5ml待测混合物，每批只操作6管；
5. 准确计时1min后，加入1.0ml的钛氧硫化合物，用微量离心机以13500g离心2min；
6. 所有管都在室温达到平衡后在405nm波长处测量吸光度，空白样含有0.54ml T-牛血清白蛋白和1ml钛氧硫化合物。