原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法

细胞样品

苏丹红Ⅲ 70%乙醇 甲醛 CaCl2 明胶 蒸馏水 甘油 苯酚

盖玻片 水浴锅 载玻片 显微镜

一、配制试剂：

1. 苏丹红Ⅲ染色液：将1g苏丹红Ⅲ溶于加温的70%乙醇溶液中过滤备用；

2. 甲醛钙固定液：将10ml甲醛和1g CaCl2混合加水至100ml；

3. 甘油明胶：将12g明胶加入120ml蒸馏水中水浴加热使其完全溶解，再加入60ml甘油和1g苯酚，充分混匀后即得。于4℃储存备用；

二、染色步骤：

1. 用Hanks液漂洗盖玻片3次；

2. 用甲醛钙固定液固定20min；

3. 用蒸馏水漂洗盖玻片3次；

4. 用70%乙醇将盖玻片冲洗3次；

5. 用苏丹红Ⅲ染色液覆盖盖片样品，染色10—30min；

6. 用70%乙醇漂洗盖片3次；

7. 用甘油明胶封片后观察；

三、结果：

原代细胞含脂类的区域呈橘红色；

在染色时，要保证时间防止染色不彻底，颜色不明显。