原位杂交与荧光原位杂交

一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 
是用标记的核酸探针，使用非放射检测系统或放射自显影系统，在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法，具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一，广泛应用于肿瘤生物学、血液病理学、遗传、微生物学、细胞和分子生物学、神经内分泌学、免疫学等领域及治疗评估和预后判断等研究中。 
菌落原位分子杂交：是指将转化或感染后的菌落印影在滤膜上，用碱裂解，中和后洗净烘干，再用目的基因的放射性DNA或mRNA作探针(Probe)进行杂交放射自显影，凡出现黑点的菌落即应中选。

二、荧光原位杂交(Fluorescence in situ Hybridization) 
是原位杂交技术大家族中的一员，因其所用探针被荧光物质标记（间接或直接）而得名，该方法在80年代末被发明，现已从实验室逐步进入临床诊断领域。基本原理是荧光标记的核酸探针在变性后与已变性的靶核酸在退火温度下复性；通过工业区光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象（即维持其原位）的前提下对靶核酸进行分析。DNA荧光标记探针是其中zui常用的一类核酸探针。利用此探针可对组织、细胞或染色体中的DNA进行染色体及基因水平的分析。在该领域中产品颇具名气的公司之一为美国Vysis公司，它是一家专业生产FISH产品的公司，其产品涉及到荧光标记探针，杂交，检测用试剂，杂交用仪器，观察分析用仪器用及软件等，几乎涵盖FISH技术所需的所有试剂和设备。 
荧光标记控针不对环境构成污染，灵敏度能得到保障，可进行多色观察分析，因而可同时使用多个探针，缩短因单个探针分开使用导致的周期过程和技术障碍。Vysis公司的荧光标记探针均为直接法标记，可省去信号放大系统，减少试剂投入且保障更大程度的特异性，同时也有信号清晰，背景低及方法简单易于操作等优点。