反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求包括选择性合适、色谱峰形良好、重现性好和应用范围宽等。
一、选择性合适:
满足不同的分离要求。
由于硅羟基的影响,许多情况下硅胶基质对整个键合相的性能起决定作用。内嵌极性基团键合相在使用高比例水溶液流动相时,色谱性能稳定。
二、色谱峰形良好:
满足定量精度、灵敏度和分离度要求。
1、定量结果更准确、更精确:
(1)纯度分析。
(2)稳定性分析。
2、灵敏度更高:
检测下限更低,对低浓度杂质有更强的检测能力。
3、分离度更好:
更有利于相邻色谱峰的分离。
三、重现性好:
重现性是液相色谱分析的基本要求。
1、色谱柱间重现性:
指同一批次合成的填料之间的重现性。
(1)柱床填充质量控制:
1)理论塔板数。
2)色谱峰对称。
3)柱反压。
(2)无选择性差异。
2、色谱柱批次间重现性:
指不同批次合成的填料之间的重现性。
(1)颗粒的物理性质。
(2)颗粒表面的化学性质。
四、应用范围宽:
1、pH值范围宽:
(1)pH>8时,许多C18硅胶基质由于填料颗粒溶解,色谱柱内产生空隙,会过早地失去柱效。随着键合相覆盖率的增加,色谱柱寿命会延长。
(2)pH<2时,许多C18硅胶基质由于键合相的水解作用,会过早地失去柱效。使用三官能团键合相可获得zui佳稳定性。
2、高温稳定性。
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