有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。
临用新制。
供试品溶液取本品,加水溶解并稀释制成每1m1中约含0.5mg的溶液。对照品贮备液取杂质Ⅰ对照品,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.25mg的溶液对照溶液精密量取供试品溶液1ml与对照品贮备液2ml,置同一200m1量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀系统适用性溶液取司他夫定系统适用性试验混合对照品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液(溶液中含杂质I、杂质Ⅲ、杂质Ⅳ、司他夫定与杂质Ⅱ)。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.01mol/L醋酸铵溶液(3.5:96.5)为流动相A,乙腈0.01mol/L醋酸铵溶液(25:75)为流动相B,按下表进行梯度洗脱;检测波长为254nm;进样体积10l时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)01000系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,调节流速使司他夫定主峰的保留时间在8.5~12.5分钟,杂质Ⅰ峰的相对保留时间约为0.28,杂质Ⅲ峰的相对保留时间约为0.5,杂质Ⅲ峰与杂质Ⅳ峰的分离度应不小于1.15,司他夫定峰与杂质Ⅱ峰的分离度应不小于1.0。测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图限度供试品溶液色谱图中如显杂质峰,胸腺嘧啶按外标法以峰面积计算,不得过0.5%,其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.2倍(0.1%),其他各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(0.5%)残留溶剂甲醇、异丙醇、甲苯、乙酸丁酯、吡啶、N,N-二甲基乙酰胺与N-甲基吡咯烷酮照残留溶剂测定法(通则0861第三法)测定供试品溶液取本品约0.5g,精密称定,精密加人二甲基亚砜-水(1:1)10ml,振摇使溶解对照品溶液分别取甲醇、异丙醇、甲苯、乙酸丁酯、吡啶、N,N-二甲基乙酰胺和N-甲基吡咯烷酮各适量,精密称定,用二甲基亚砜-水(1:1)定量稀释制成每1m1中分别含甲醇0.15ng、异丙醇0.15mg、甲苯0.0445mg、乙酸丁酯0.15mg、吡啶0.01mg、N,N-二甲基乙酰胺0.0545mg和N甲基吡咯烷酮0.0265mg的溶液,摇匀。
色谱条件用聚乙二醇TPA修饰的毛细管色谱柱;起始温度为40℃,维持5分钟,以每分钟15℃的速率升温至120℃,维持2分钟,再以每分钟10℃的速率升温至200℃,维持5分钟;进样口温度为150℃;检测器温度为250℃;进样体积1l。系统适用性要求各相邻色谱峰间的分离度均应符合要求,测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注人气相色谱仪,记录色谱图。限度按外标法以峰面积计算,含异丙醇与乙酸丁酯不得过0.3%,其他均应符合规定三氯甲烷照残留溶剂测定法(通则0861第二法)测定,供试品溶液取本品约0.25g,精密称定,置顶空瓶中,精密加水5ml与无水硫酸钠1g,摇匀。对照品溶液取三氯甲烷适量,精密称定,用水溶解并定量稀释制成每1ml中含3μg的溶液,精密量取5ml,置顶空瓶中,加无水硫酸钠1g,摇匀色谱条件以5%苯基-95%甲基聚硅氧烷(或极性相近)为固定液的毛细管柱为色谱柱;柱温为45℃;进样口温度为150℃C;检测器温度为250℃;顶空瓶平衡温度为90℃,平衡时间为30分钟测定法量取供试品溶液与对照品溶液分别顶空进样记录色谱图限度按外标法以峰面积计算,应符合规定水分取本品0.2g,照水分测定法(通则0832第一法)测定,含水分不得过0.5%炽灼残渣取本品1.0g,依法检查(通则0841),遗留残渣不得过0.1%。重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣,依法检查(通则0821第二法),含重金属不得过百万分之二十。
