发布时间:2019-09-12 15:04 原文链接: 噬菌体展示技术研究RNA结合蛋白实验

  • 噬菌体展示技术研究RNA结合蛋白实验

           

实验方法原理 噬菌体展示技术是将外源基因与噬菌体的表面蛋白基因融合,在融合了外源基因的噬菌体颗粒的表面就会表达相应的外源蛋白,即外源基因编码的蛋白被展示在噬菌体颗粒的表面。
实验材料

载体 tRNA 抗体 寡核苷酸

试剂、试剂盒

抗生素储存液 BCIP 葡萄糖储存液 X-Gal 磁珠洗液 蛋白酶抑制剂 RNase 抑制剂 TENT 结合缓冲液 印迹缓冲液 牛血清白蛋白 考马斯亮蓝染液 丙烯酰胺凝胶配制缓冲液 电泳缓冲液 乙酸钠

仪器、耗材

顶层琼脂 LB YT 顺磁珠和磁架 干胶装置及玻璃纸 核酸电泳装置 体外转录试剂盒

实验步骤

一、材料与设备

所有操作中使用的均为蒸馏过的去离子水。

1. 载体:pDISPLAYblue B;宿主菌:DH12S(Gibco BRL 公司);辅助噬菌体:M13K07(Gibco-BRL 公司)。

2. 抗生素储存液(1000X):氨苄青霉素(100 mg/ml,水溶液);卡那霉素(70 mg/ml,水溶液);甲氧苯青霉素(200 mg/ml,水溶液)。过滤除菌后分装,-20℃ 保存。

3. 培养液/基:


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