前日,西南大学夏老师通过电话咨询后在我司购买了elisa试剂盒,在电话中,夏老师与我司何经理进行了在线问答:
夏老师:血清样本如何处理?
何经理:全血标本应于室温放置2小时或4℃guo夜后于1000×g离心20分钟。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
夏老师:血浆样本要怎么处理?
何经理:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,于1000×g离心15分钟,
仔收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
夏老师:细胞上清液样本如何处理?
何经理:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(1000×g)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心10分钟左右(5000×g)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心 。
夏老师:为什么有的试剂盒是采用竞争ELISA法?
何经理:小分子抗原或半抗原因为缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法。其原理是标本中的抗原和固相载体上的抗原竞争生物素化抗体上的结合位点,标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的生物素化抗体愈少,*后的显色也愈浅,即显色深浅与样本中的抗原浓度成反比。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。
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