基因检测技术基于多种原理,以下是一些常见的:
聚合酶链式反应(PCR):通过高温变性、低温退火和适温延伸的多次循环,使特定 DNA 片段呈指数级扩增,从而实现对微量 DNA 的检测和分析。
荧光定量 PCR(qPCR):在 PCR 反应体系中加入荧光基团,随着 PCR 反应的进行,荧光信号不断累积,通过检测荧光强度可以实时监测 DNA 扩增的过程,并对起始模板进行定量分析。
基因测序:
一代测序(Sanger 测序):利用双脱氧核苷酸(ddNTP)在 DNA 合成过程中随机终止链延伸,产生不同长度的 DNA 片段,然后通过电泳分离和检测这些片段,从而确定 DNA 序列。
二代测序(Next-generation sequencing,NGS):一次能对几十万到几百万条 DNA 分子进行并行测序,原理包括边合成边测序、连接法测序等,大大提高了测序通量。
基因芯片(DNA 微阵列):将大量已知序列的核酸探针固定在芯片表面,然后与标记的样本核酸进行杂交,通过检测杂交信号来确定样本中基因的表达情况或基因突变。
核酸杂交技术:基于 DNA 双链互补配对的原理,使用标记的核酸探针与待测核酸进行杂交,从而检测特定基因的存在或变异。
这些技术的基本原理都是利用核酸的化学和物理特性,以及碱基互补配对原则,来检测和分析基因的结构、表达和变异。
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