大鼠敞箱实验／旷场实验方法总结

一.基本原理

动物进入敞箱后因其对新异环境的恐惧而主要在敞箱内靠周边的区域活动，在中央区域的活动较少。然而，动物的探究特性又促使其产生在中央区域活动（包括运动、饮水或进食）的动机，因而形成冲突状态。抗焦虑剂（如地西泮）可解除这种冲突状态，表现为在不改变活动计数的剂量明显增加大鼠进入敞箱中央区域的次数及在中央区域逗留的时间（Stefanski法）或增加大鼠在中央区域的饮水时间（Stout-weiss法），致焦虑剂（如FG7142）则使饮水时间明显减少。

二.操作步骤

Stefanski法：实验装置为一圆形敞箱，直径80cm，高30cm；敞箱底部中央划有直径分别为35cm和50cm的内外两个圆圈，内圈所包含的区域为中央区；靠近底部的侧壁上对称装有3个光电管，并可通过毕露电视观察老鼠的活动情况。实验在弱光照明、65dB的白噪声(背景声)下进行。实验用雄性Wistar大鼠，体重200-240g。将大鼠置于敞箱中央，观察10min内大鼠总的活动计数、进入敞箱外圈的次数（从敞箱周边向中央区域运动约为15cm为一次）和在敞箱中央区域逗留的时间。

Stout-weiss法：（敞箱饮水实验，the open field drink test，OFDT），实验用一36cm*36cm*36cm的透明有机玻璃箱，其底部漆成黑色，顶部敞开（此实验仪器可由上海欣软信息科技有限公司提供）。箱子的中烟倒着悬挂一水瓶，瓶嘴离地10cm；箱的上方离地面60cm处有一25w的白炽灯用于照明。除一面外，箱体其余三面都用黑色隔板遮挡，以排除额外的的可见刺激。实验前至少三天每天抚摸大鼠1min，以减少非特异性应激对实验的影响；实验前3天每天仅饮水1h（下午3：00-4:00）。实验时将大鼠置于敞箱中央，观察10min内大鼠开始饮水的潜伏期、饮水时间（主要指标）、靠近水瓶的次数及站立数等。

三 .注意事项与评价

（1）在每只大鼠实验后，用5%的醋酸水溶液彻底清洁实验箱，以防止嗅觉暗示传递给下一只大鼠。

 (2)敞箱实验由于其设备简单、操作简便，在行为研究中使用非常普遍，多用来评价动物的运动活性等综合行为。而作为焦虑模型只是近几年才发展起来的，所获得的实验资料有限。因此，其稳定性及可靠性还有待进一步验证，最好结合其它焦虑模型评价药物的效应。值得注意的是，丁螺环酮尽管在其它许多模型上不敏感，但在本实验中0.3mg/kg即有抗焦虑作用。