如何用TL2020组织研磨破碎仪研磨内脏及肿瘤细胞提取RNA？

鼎昊源科技通过大量样品破碎测试发现，动物组织样品相比其他样品更难破碎，特别是一些内脏组织、结缔组织、心脏肌肉组织、肺部组织，一般很难用手工或者常规组织匀浆仪彻底破碎。因为这些动物组织样品一般韧性较大，如果使用手工研磨或者组织匀浆仪，不仅一次处理量太少、易污染且难清洗，处理后的样品还不够均匀细致，达不到后续提取RNA等实验的要求。2015年3月 - 4月，北京某生物公司研发人员使用TL2020组织研磨破碎仪(又称TL2020高通量组织研磨仪)研磨内脏及肿瘤细胞，后续提取RNA，实验顺利，效果很好，以下是本次研磨实验的主要流程，可供相关实验人员参考：

【材料准备】

样品种类：人体肿瘤细胞、胰腺、前列腺、脂肪、肌肉，每个组织各研磨2个样品，用液氮处理保存。

研磨配件种类：鼎昊源TL2020组织研磨破碎仪2.0ml研磨管适配器（28×2.0ml）1对，6mm不锈钢研磨珠若干颗。

【研磨实验流程】

1. 高温灭菌预处理6mm不锈钢研磨珠；

2. 将灭菌处理过的研磨珠与研磨管适配器置入液氮中同时进行预冷处理；

3. 将样品从液氮中取出，在研钵中切割成约4-5mm宽的样品小块。

4. 在2ml无菌圆底离心管(进口)中依次加入：预冷6mm研磨钢珠1颗、切好的样品块1块、预冷6mm研磨钢珠1颗。

5. 确保离心管中有2颗6mm研磨钢珠和1块样品块后，快速盖好管盖，对称放入预冷的2.0ml研磨管适配器孔槽中。

6. 将适配器固定在TL2020组织研磨破碎仪的两个摇臂上，设置转速1800rpm，时间120S（胰腺样品180S），一键开始研磨。

8. 研磨时间结束，卸载适配器取出离心管，在管中快速加入裂解液，然后按照后续RNA提取实验步骤操作。

【研磨效果】

后续成功提取出RNA，且电泳图条带清晰可见。

本实验中，使用TL2020组织研磨破碎仪一次性高速破碎56个2ml的内脏样品组织，不仅操作灵活方便，还能安全轻松地进行液氮冷冻研磨操作，保证了RNA提取等温度敏感性后续实验的顺利进行。此外，用TL2020进行类似的动物样品组织研磨，避免了样品间的交叉污染，省去了清洗仪器的繁琐工作，对于样品量巨大且需要无菌操作的实验，无疑大大提高了效率。