如何计算显微镜下视野面积

 在显微镜下进行病理读片,是病理医师工作中的重要内容之一。显微镜观察和记录的结果是临床诊断的科学依据。正确标准的使用显微镜, 观察和记录读片结果才具有科学性。众所周知, 显微镜的成像首先是由物镜对标本放大成像,然后由目镜一次放大被人们肉眼观察到。所能呈现图像的视野大小是由目镜的视场数决定的。需要说明的是, 本篇所阐述的观察和记录, 于通过目镜的显微镜观察和记录。不经目镜观察的其他光路采集记录图像, 如 CCD、 数码相机、 由软件操作采集图像等另述。显微镜目镜的视场数( field number, FN) 不同, 镜下能看到的视野大小就不同,不同的面积区域对镜下阳性率计数有影响,我们应该了解目镜视数与视场面积的关系。视场数小能看到的视场面积就小, 反之, 视场数大则能看见的视场面积就大。

1  目镜视场数的标识 

       显微镜设计和生产具有国际化标准,在显微镜的目镜上都会标识视场数, 如奥林巴斯 BX50 型显微镜, 目镜视场数22( 22 数值前的英文和数字标识是目镜分类名和倍率) 。

2 实际视场和计算公式

       在标本平面上,显微镜能够观察到的区域( 圆形区域) 叫做实际视场,也称视野。用以下公式计算可得知面积大小。

3 物镜倍率

       物镜是用于显微镜成像的重要光学部件。生物显微镜常用物镜倍率有 4   、 10  、 20   、 40   和100  。病理学计数常用的高倍物镜是指 40   。

4 中间倍率

       直接通过目镜观察无需考虑中间倍率。中间倍率是指加在光路中的 CCD 接口、 摄影目镜以及CCD 元件等的倍率。因为现在使用的显微镜大都是无限远成像系统, 附加有荧光观察、 本差观察、 微分干涉观察等, 元件不会改变倍率, 不需要考虑。

5 常用目镜下的视场面积

       zui常用目镜视场数是 22。各显微镜制造商相继设计生产有视场数是 25 的宽视场目镜, 视场数是 26 5 的超宽视场目镜。也有视场数是 18、 20 的较小视场数的目镜。